【摘 要】
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将Lipomycesstarkeyi CGMCC 2.1390菌株的DEX基因进行PCR扩增并克隆至表达载体pPICZαA上,将重组质粒转化至Pichia pastoris X33细胞中进行甲醇诱导分泌表达。质粒转化至Pich
【机 构】
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吴江近岸蛋白质科技有限公司,复旦大学生命科学学院
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将Lipomycesstarkeyi CGMCC 2.1390菌株的DEX基因进行PCR扩增并克隆至表达载体pPICZαA上,将重组质粒转化至Pichia pastoris X33细胞中进行甲醇诱导分泌表达。质粒转化至Pichia pastoris X33细胞中,经1%甲醇诱导72h表达重组蛋白,培养基上清中DEX浓度和酶活力分别为14.3mg/L、25648U/L。重组蛋白经过两步层析纯化后,纯度为90%,酶活力回收率为58.4%,比活力为7130U/mg。重组DEX最适反应温度为35℃,最适反应p H
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