【摘 要】
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目的 探讨联合抑制转化生长因子-βRⅡ受体(TGF-βRⅡ)和卷曲蛋白-7(FZD-7)对肝癌细胞增殖和转移的影响及机制.方法 实验分5组:空白组(Blank)、阴性对照组(shNC)、TGF-βRⅡ
【机 构】
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徐州医学院附属医院介入放射科,江苏,221002
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目的 探讨联合抑制转化生长因子-βRⅡ受体(TGF-βRⅡ)和卷曲蛋白-7(FZD-7)对肝癌细胞增殖和转移的影响及机制.方法 实验分5组:空白组(Blank)、阴性对照组(shNC)、TGF-βRⅡ干扰组(shTGF-βRⅡ)、FZD-7干扰组(shFZD-7)及TGF-βRⅡ和FZD-7共同干扰组(shTGF-βRⅡ+shFZD-7).用shTGF-βRⅡ和(或)shFZD-7转染HepG2和Huh-7细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力,流式细胞仪检测细胞周期的变化,Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)、C-myc、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达.结果 转染后96 h,共同干扰组HepG2、Huh-7细胞吸光度(A)值(0.87 ±0.09、0.63 ±0.03)较TGF-βRⅡ(1.12 ±0.02、0.82 ±0.08)或FZD-7(1.06 ±0.04、0.77 ±0.04)单基因干扰组明显下降(P＜0.05);Transwell实验表明,与TGF-βRⅡ或FZD-7单基因干扰组比较,共同干扰组HepG2、Huh-7细胞迁移、侵袭的细胞数明显降低(P＜0.01);Huh-7细胞共同干扰组G1期细胞百分比为(85.74 ±0.91)％,较TGF-βRⅡ的(69.70±2.45)％或FZD-7的(74.86±1.02)％单基因干扰组明显增加(P＜0.01);灰度分析显示HepG2、Huh-7细胞共同干扰组较TGF-βRⅡ或FZD-7单基因干扰组,β-catenin、C-myc、Cyclin D1蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 联合干扰TGF-βRⅡ和FZD-7基因可以通过下调β-catenin、C-myc、Cyclin D1的表达对肝癌细胞的增殖和转移产生协同抑制作用.
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