论文部分内容阅读
目的：克隆、表达小鼠睾丸膜联蛋白A1，并研究其在睾丸中的定位。方法：利用RT-PCR技术从小鼠睾丸组织中扩增膜联蛋白A1的cDNA序列，将该基因插入GST融合表达载体pGEX-5T。以亲和层析法纯化蛋白免疫家兔制备多抗，并做睾丸切片免疫组织化学检测。结果：重组质粒测序结果表明，插入片段与小鼠膜联蛋白A1的序列完全一致。K802重组菌高效表达出相对分子质量为63000的融合蛋白，表达量占菌体总蛋白的30％。多抗效价达1：102400，可特异识别重组蛋白。免疫组织化学显示膜联蛋白A1主要分布于精原细胞核、精子