【摘 要】
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【目的】克隆H9N2亚型禽流感病毒（AIV）河南株核蛋白（NP）基因,并将NP主要抗原表位区在大肠杆菌中进行表达,为禽流感基因工程诊断抗原的制备和开发奠定基础。【方法】根据GenBank公
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院,河南省兽药监察所
【基金项目】
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国家“十一五”科技支撑计划专项（2006BAD06A08）
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【目的】克隆H9N2亚型禽流感病毒（AIV）河南株核蛋白（NP）基因,并将NP主要抗原表位区在大肠杆菌中进行表达,为禽流感基因工程诊断抗原的制备和开发奠定基础。【方法】根据GenBank公布的禽流感病毒NP基因序列设计引物,采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,从H9N2亚型AIV河南株感染的鸡胚尿囊液RNA中扩增AIV河南株NP全基因,将扩增的PCR产物克隆到pGEM-T easy载体并进行测序。通过PCR和酶切方法将NP主要抗原表位区亚克隆到原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET
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