【摘 要】
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应用噬菌体展示技术制备抗Met（HGF受体，一个与肿瘤发生、侵袭和转移相关原癌基因产物）特异性、高亲和力的全人Fab片段．Fab基因分三步合成，以从错配PCR突变库中筛选出的Fab基因可变
【机 构】
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南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室,VanAndelResearchInstitute,南京军区军事医学研究所
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应用噬菌体展示技术制备抗Met（HGF受体，一个与肿瘤发生、侵袭和转移相关原癌基因产物）特异性、高亲和力的全人Fab片段．Fab基因分三步合成，以从错配PCR突变库中筛选出的Fab基因可变区为模板，扩增VH和VL基因，分别与CHl、CL基因融合，合成Fd和L基因，再拼接合成Fab基因，克隆于pComb3XSS中，构建Fab次级抗体库．经细胞筛选和固相筛选，获得高亲和力阳性克隆．工程菌经IPTG诱导表达，SDS—PAGE和蛋白质印迹分析，在25ku和27ku出现预期大小蛋白质条带．Fab分子经流式细胞术、免
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