【摘 要】
：
目的评价重组嵌合表达人偏肺病毒(hMPV)表位的流感病毒的免疫应答及免疫保护效果。方法用8质粒系统拯救出的在NS基因中嵌合hMPV表位的重组流感病毒免疫BALB/c小鼠，检测其刺激机体产生的针对hMPV和流感病毒的抗体滴度，及脾细胞分泌细胞因子含量。免疫后小鼠用hMPV和流感病毒进行攻击，对攻击后小鼠肺组织和鼻甲骨中病毒含量采用数字PCR方法进行测定，同时对肺组织进行HE染色，评价其对肺部损伤的保
【机 构】
：
天津市疾病预防控制中心病原生物研究室 300011,天津医科大学总医院妇产科细胞病理学室 300052,天津市疾病预防控制中心病原生物研究室 300011,天津市疾病预防控制中心病原生物研究室 300
论文部分内容阅读
目的评价重组嵌合表达人偏肺病毒(hMPV)表位的流感病毒的免疫应答及免疫保护效果。
方法用8质粒系统拯救出的在NS基因中嵌合hMPV表位的重组流感病毒免疫BALB/c小鼠，检测其刺激机体产生的针对hMPV和流感病毒的抗体滴度，及脾细胞分泌细胞因子含量。免疫后小鼠用hMPV和流感病毒进行攻击，对攻击后小鼠肺组织和鼻甲骨中病毒含量采用数字PCR方法进行测定，同时对肺组织进行HE染色，评价其对肺部损伤的保护作用。
结果重组流感病毒株rFLU/hMPV/B(嵌入了hMPV的B细胞表位)免疫小鼠后，产生了针对hMPV和流感病毒的特异性抗体。rFLU/hMPV/CTL＋Th(嵌入了CTL表位/Th细胞表位)免疫小鼠后，产生了针对流感病毒的特异性抗体及hMPV特异的细胞毒性T淋巴细胞反应(IFN-γ分泌增多)。rFLU/hMPV/B和rFLU/hMPV/CTL＋Th引起了平衡的Th1/Th2免疫应答。用hMPV和流感病毒攻击重组病毒免疫后小鼠，肺组织病理HE染色结果显示重组病毒免疫后小鼠肺病变明显减轻，肺组织和鼻甲骨中hMPV和流感病毒含量也明显减少。
结论重组的2株嵌合有hMPV B细胞表位和CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株，可刺激机体产生针对hMPV和/或流感病毒体液免疫应答，嵌合有hMPV CTL表位/Th细胞表位的重组流感病毒株还可刺激机体产生hMPV特异性的细胞免疫应答，对hMPV和流感病毒攻击也有一定保护作用，该重组病毒株有潜在疫苗应用价值。
其他文献
目的研究临床常用抗生素对多重耐药革兰阴性杆菌的协同和相加作用，初步建立体外联合药效数据库。方法选取磷霉素(PHOS)、左氧氟沙星(LEV)、头孢他啶(CAZ)、复方新诺明(SMZ)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、头孢哌酮/舒巴坦(SCF)和亚胺培南(IMP)7种抗生素，两两组合为21种药物组。经超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)确认，172株多重耐药革兰阴性杆菌分为
目的初步探讨抗生素诱导的肠道菌群失调对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mp)呼吸道感染的影响。方法C57BL/6J小鼠口服万古霉素和庆大霉素21 d后滴鼻感染Mp。实时荧光定量PCR(qPCR)分析抗生素处理前后小鼠粪便中5个主要菌门的菌量；qPCR检测感染后3 d和7 d肺组织中Mp载量；病理切片和HE染色分析肺组织炎症病理改变；流式细胞术分析小鼠脾脏T淋巴细胞分泌的I
目的探讨人胚胎发育过程中间充质干祖细胞(MSPCs)与造血细胞间的起源关系。方法取发育不同时间药流胚胎，分离不同造血组织消化成单个细胞，于高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)培养体系培养10～14 d，倒置显微镜下挑取直径大于0.5 mm的HPP-CFC集落于液体培养体系进行二次培养，对二次培养中出现的贴壁细胞进行扩增并鉴定其细胞表面分子的表达，于不同分化体系鉴定其是否具有MSPCs的分化特性
目的分离、鉴定口腔变黑普雷沃氏菌(Prevotella nigrescens，P.nigrescens)，探讨其对食管鳞癌是否有促进作用。方法胰豆胨肝粉琼脂(GAM)培养基厌氧原代培养慢性牙周炎患者龈沟液，挑选黑色菌落分离纯化；革兰染色、16S rRNA基因测序鉴定分离的单克隆细菌；该细菌感染食管鳞癌细胞NE6-T后细胞生物学性状变化。结果慢性牙周炎患者龈沟液厌氧原代培养120 h后可见多个菌落，
目的探索HIV-1包膜蛋白gp120在神经元损伤引起认知障碍中的作用。方法免疫印迹和免疫荧光检测gp120处理后的小胶质细胞活化、炎症因子表达和神经元损伤情况；免疫组化分析gp120转基因小鼠的神经元损伤情况；行为学分析转基因小鼠的神经认知状况。结果体内和体外试验结果表明HIV-1 gp120可显著诱导caspase-1与IL-1β表达，并间接引起神经元突触变短和神经元损伤(P<0.05)；与野生
目的检测艰难梭菌毒素B(TcdB)对结肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响，研究其引起细胞凋亡的相关机制。方法采用不同浓度的TcdB处理SW480细胞，采用MTT法检测细胞增殖情况；用流式细胞术检测细胞的凋亡及线粒体膜电位变化情况。结果TcdB显著抑制了结肠癌SW480细胞的增殖，作用48 h后的抑制率为46.36%，呈一定的时间-浓度相关性；流式细胞仪检测结果表明，浓度为800 ng/ml的Tcd
2019年12月中旬我国湖北省武汉市人群中出现了2019新型冠状病毒(2019-nCoV)感染性肺炎暴发流行，疫情迅速蔓延并播散至全国各个地区以及亚洲、欧洲、大洋州和北美13个国家。为了准确和深入了解2019-nCoV生物学性状、流行特征、致病性、免疫性、微生物学检查和公众防护措施，我们在最新有关文献和国家《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》最新版本的基础上，对2019-nCoV及其感染性肺炎进行综
目的初步探讨花粉症患者在花粉季节发作期外周血Ⅱ型固有淋巴样细胞(ILC2)亚群表达水平、功能变化及其胞内STAT6信号通路水平变化。方法纳入10例花粉症患者、10例尘螨致敏哮喘患者以及12例健康儿童，分别在花粉季节发作期和非发作期采用流式细胞术监测其外周血ILC2细胞及其胞内Th2型因子水平变化。分选各组外周血Lin－细胞亚群，体外给予前炎症因子(IL-25和IL-33)刺激培养7 d，酶联免疫吸
目的探讨重症手足口病(HFMD)患儿血清及脑脊液Bcl-2/腺病毒E1B19kDa相关蛋白3(BNIP3)的表达水平及其临床意义。方法90例HFMD患儿分为危重型组(临床分期3期)、重型组(临床分期2期)和经脑脊液等检查排除中枢神经系统感染的普通型组(临床分期1期)，每组30例；另选取同期健康体检的30例儿童作为对照组。测定HFMD患儿治疗前后血清及脑脊液BNIP3水平，并同时测定患儿血清神经元特
2019新型冠状病毒(2019 novel coronavirus，2019-nCoV)是继严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome-coronavirus，SARS-CoV)和中东呼吸综合征冠状病毒(middle east respiratory syndrome-coronavirus，MERS-CoV)后出现的一种能引起人严重呼吸道疾病的