【摘 要】
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目的 探讨人参皂苷对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响,及其对miR-654的调控作用。方法 用LPS诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞)建立脓毒症所致急性肾损伤模型。实验分组:空白组(正常培养的细胞)、模型组(5μg·mL-1 LPS干预24 h)和低、中、高剂量实验组(1,2和3μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)、miR-NC组(转染m
【基金项目】
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武汉市卫生和计划生育委员会基金资助项目(WZ18Q03);
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目的 探讨人参皂苷对脂多糖(LPS)诱导的肾小管上皮细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响,及其对miR-654的调控作用。方法 用LPS诱导肾小管上皮细胞(HK-2细胞)建立脓毒症所致急性肾损伤模型。实验分组:空白组(正常培养的细胞)、模型组(5μg·mL-1 LPS干预24 h)和低、中、高剂量实验组(1,2和3μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)、miR-NC组(转染miR-NC后,用5μg·mL-1 LPS干预24 h)、miR-654组(转染miR-654 mimics后,用5μg·mL-1 LPS干预24 h)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC后,用2μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)、anti-miR-654组(转染anti-miR-654后,用2μg·mL-1人参皂苷+5μg·mL-1 LPS共同干预24 h)。用噻唑蓝法检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡率,用试剂盒检测丙二醛(MDA)的含量,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测miR-654的表达水平。结果 低、高剂量实验组和模型组、空白组的细胞活力(光密度值)分别为0.99±0.03,1.38±0.01,0.66±0.04和1.67±0.02,凋亡率分别为(22.44±0.50)%,(14.11±0.42)%,(28.11±0.32)%和(8.33±0.34)%,MDA分别为(44.06±1.01),(22.22±0.95),(55.67±0.96)和(16.04±0.46)nmol·mL-1,miR-654表达水平分别为0.42±0.02,0.84±0.02,0.33±0.02和1.04±0.03,模型组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且低、高剂量实验组的上述指标比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。miR-NC组和miR-654组的细胞活力分别为0.63±0.02和1.32±0.04,凋亡率分别为(26.00±0.41)%和(15.56±0.44)%,MDA分别为(51.11±0.79)和(15.89±0.42)nmol·mL-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。anti-miR-NC组和anti-miR-654组的细胞活力分别为1.31±0.02和0.75±0.02,凋亡率分别为(16.00±0.01)%和(26.44±0.56)%,MDA分别为(1.31±0.02)和(0.75±0.02)nmol·mL-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 人参皂苷可通过上调miR-654,进而促进细胞增殖,抑制细胞凋亡和氧化应激,从而减轻LPS诱导的肾小管上皮细胞损伤。
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