探讨微小RNA-520e(miR-520e)对肺癌细胞株A549细胞迁移和侵袭的影响及其分子机制。
方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺癌细胞A549和正常肺上皮细胞BEAS-2B中miR-520e的表达差异，转染miR-520e模拟物(miR-520e mimics)获得miR-520e过表达细胞株，迁移实验及Transwell实验检测miR-520e对A549细胞迁移和侵袭的影响。生物信息学预测miR-520e靶向锌指蛋白367(ZNF367)基因，通过双荧光素酶报告体系进行验证。Western blot检测miR-520e过表达对ZNF367蛋白表达的影响，采用小干扰RNA(siRNA)研究ZNF367对A549细胞迁移和侵袭的影响。
结果RT-PCR结果显示，相对于BEAS-2B细胞(1.000±0.135)，A549细胞中miR-520e表达量为0.342±0.214(P＝0.000)。转染miR-520e mimic后，相对空白对照(NC)组(1.000±0.273)，mimic组miR-520e过表达(2.617±0.124，P＝0.000)。划痕培养24 h后，与NC组[(100.000±12.347)%]相比，mimic组细胞迁移率为[(43.727±16.746)%]，scramble组细胞迁移率为[(91.722±7.631)%]，过表达miR-520e抑制肺癌细胞迁移(P＝0.000)。侵袭实验结果显示，mimic组发生侵袭的细胞数[(36.458±21.301)%]与miR-520e scramble组[(93.783±9.125)%]和NC组[(100.000±15.114)%]比较减少(P＝0.000)。荧光素酶报告基因结果显示，转染miR-520e mimics抑制荧光素酶的活性(0.374±0.241，P＝0.000)。RT-PCR和Western blot发现miR-520e mimics下调ZNF367的表达(0.426±0.153, P＝0.000；0.368 ±0.127，P＝0.000)。进一步实验发现，miR-520e靶向ZNF367基因调控肺癌细胞的迁移和侵袭。
结论miR-520e通过调控ZNF367抑制肺癌A549细胞的迁移和侵袭。