【摘 要】
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根据杆状病毒表达系统的密码子偏好性,对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV) VP2基因序列进行密码子优化,然后合成序列.优化后的序列被定向克隆至转移载体pFast BacTM1,转化DH10BacTM
【机 构】
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江西农业大学动物科学技术学院,江西南昌330045;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京海淀100097;江西农业大学动物科学技术学院,江西南昌330045;北京农学院
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根据杆状病毒表达系统的密码子偏好性,对鸡传染性法氏囊病毒(IBDV) VP2基因序列进行密码子优化,然后合成序列.优化后的序列被定向克隆至转移载体pFast BacTM1,转化DH10BacTM感受态细胞获取重组杆状病毒穿梭质粒,转染昆虫细胞SF9,获得P0代重组杆状病毒.间接免疫荧光鉴定和Western blot分析结果显示,病毒reBac-VP2感染昆虫细胞后,能够在昆虫细胞的上清中稳定表达VP2蛋白,而且能够与IBDV的抗体发生特异性结合,具有良好的免疫原性.本试验成功构建了能够分泌表达VP2蛋白的重组杆状病毒,为IBDV诊断试剂及亚单位疫苗研发提供了工具.
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