【摘 要】
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目的应用半巢式PCR扩增ITS2区方法对50例真菌性角膜溃疡患者进行病原学鉴别，探讨其应用价值。方法收集50例真菌性角膜溃疡患者及3种真菌标准菌株培养物，分别提取菌株基因组DNA，半巢式PCR扩增ITS2区，扩增产物经测序后，结果与NCBI基因库中的核酸序列进行比对，确定致病菌的种属，并进一步对其分布特征进行分析。结果3种真菌标准菌株的测序结果与基因库中一致。50例真菌角膜溃疡患者主要致病菌依次为
【机 构】
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目的应用半巢式PCR扩增ITS2区方法对50例真菌性角膜溃疡患者进行病原学鉴别，探讨其应用价值。
方法收集50例真菌性角膜溃疡患者及3种真菌标准菌株培养物，分别提取菌株基因组DNA，半巢式PCR扩增ITS2区，扩增产物经测序后，结果与NCBI基因库中的核酸序列进行比对，确定致病菌的种属，并进一步对其分布特征进行分析。
结果3种真菌标准菌株的测序结果与基因库中一致。50例真菌角膜溃疡患者主要致病菌依次为：镰刀菌属感染24例（其中茄病镰刀菌感染17例，尖孢镰刀菌感染6例，串珠镰刀菌感染1例），占48%；曲霉菌属感染10例（其中黄曲霉感染5例，聚多曲霉感染3例，构巢曲霉感染2例），占20%；青霉菌属感染6例（其中黄绿青霉菌感染2例，多色青霉菌感染2例，草酸青霉菌感染2例），占12%；念珠菌属感染5例（其中白念珠菌感染3例，近平滑念珠菌感染2例），占10%；枝孢霉菌属感染3例（其中草本枝孢霉感染2例，枝状枝孢霉感染1例）；粗糙链孢霉感染1例；互隔交链孢霉菌感染1例。
结论半巢式PCR扩增ITS2区能快速、简便、准确地鉴别诊断真菌性角膜溃疡，为个性化治疗及本地区真菌的流行病学调查奠定基础。（中华检验医学杂志，2012,35：1163-1166）
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