【摘 要】
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目的 制备调节性CD~+ CD25~+T细胞(Treg)分析其免疫功能,诱导局部免疫耐受防治同种异体复合组织移植(CTA)排斥反应.方法 采用免疫磁珠法(MACS)从雄性大鼠脾脏细胞分离CD4~+CD25~+Treg(1×10~6),2%锥虫蓝染色检测活性、流式细胞术分析其纯度,在5 mg/L抗CD3的刺激下观察其反应性、增殖及其与200 U/ml细胞介素(IL)-2的关系.结果 从8只雄性大鼠脾
【机 构】
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710032,西安,第四军医大学西京医院全军整形外科研究,710032,西安,第四军医大学西京医院全军整形外科研究,全军临床检验医学中心,710032,西安,第四军医大学西京医院全军整形外科研究,第四
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目的 制备调节性CD~+ CD25~+T细胞(Treg)分析其免疫功能,诱导局部免疫耐受防治同种异体复合组织移植(CTA)排斥反应.方法 采用免疫磁珠法(MACS)从雄性大鼠脾脏细胞分离CD4~+CD25~+Treg(1×10~6),2%锥虫蓝染色检测活性、流式细胞术分析其纯度,在5 mg/L抗CD3的刺激下观察其反应性、增殖及其与200 U/ml细胞介素(IL)-2的关系.结果 从8只雄性大鼠脾脏分选出的CD4~+CD25~+Treg活性平均为(97.90±0.36)%及纯度为(96.05±0.41)%,CD3刺激呈低反应,按比例培养抑制率为89%,IL-2可使CD4~+CD25~-抑制逆转.结论 MACS能快速分选出较高纯度的CD4~+CD25~+Treg,并且活性良好在体外具有免疫无能及免疫抑制作用,能满足动物CTA排斥反应研究的需要。
其他文献
缺血预适应(IPC)是一种强有力的内源性的心肌保护机制,能明显减轻缺血再灌注(IR)损伤所引起的心肌细胞坏死与凋亡,但其确切的作用机制尚不清楚[1,2].近年研究提示,IPC对心肌的这种保护机制可能线粒体钾通道有着密切的关系.本研究观察应用特异性线粒体钾通道抑制剂5-羟基尿(5-HD)对IPC心脏保护效应的影响并探讨其内在机制,从细胞凋亡角度探讨在IPC中的作用。
目的 以成纤维细胞NIH3tT13作为细胞模型,探讨bel-2 Loop Domain结构域在成纤维细胞凋亡中的作用地位.方法 构建正常和Loop Domain结构域突变bcl-2基因的真核表达质粒,用于成纤维细胞转染;脂质体介导,分别将(1)空载体质粒(2)携带bcl-2基因质粒和携带突变基因的质粒转染成纤维细胞(NIH3T3),转染后用肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激NIH3T3细胞诱导凋亡,应
目的 总结制作大鼠渐进性脑死亡模型的技巧并改良此模型的制作方法.方法 对经典Pratschke术式的麻醉、插管、颅内加压、脑死亡判断等环节进行探讨,建立Wistar大鼠的渐进性脑死亡模型.结果 所有动物在诱导脑死亡过程中均出现较一致的血压变化规律:诱导后期平均动脉压开始急剧升高,于颅内加压后(11±2)min时达到峰值(190±15)mm Hg,其后血压急剧下降,(20±3)min时达到谷值(70
众多研究结果显示前列腺上皮源性Ets转录因子(PDEF)具有较强的肿瘤相关性,提示可以在临床上以PDEF作为靶基因,制定出特异性的肿瘤治疗和控制方案[1],我们先期研究表明随着前列腺癌临床分期进展,PDEF mRNA的表达强度也不断增强,提示PDEF基因的表达存在明显的临床分期的表达差异,说明PDEF与前列腺癌的转移浸润有关[2].本研究旨在探讨PDEF在激素非依赖型前列腺癌中的表达情况及其与临床
目的 观察骨形成发生蛋白4(BMP4)和Smad4在阿霉素诱导U251细胞抑制中的表达变化.方法 应用噻唑蓝(MTT)检测空白组和阿霉素组U251细胞增长活性,应用公式(1-阿霉素组A/空白组A)×100%计算阿霉素组U251细胞增长抑制率.应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测空白组和阿霉素组BMP4和Smad4的表达.结果 阿霉素在24、36、48、60、72 h对细
目的 检测临床手术切除42例结直肠癌及相应正常组织环氧化酶-2(COX-2)、错配修复酶-1(hMLH1)微卫星不稳定状态(MSI)及二种基因启动子甲基化,探讨它们与结直肠癌发生的关系.方法 采用聚合酶链反应(PCR)技术检测5个位点的MSI状态;甲基化特异性PCR(MSP)方法检测结直肠癌及正常组织COX-2、hMLH1二种基因启动子CpG岛甲基化状态.结果 42例结直肠癌中MSI总检出率为42
目的 探讨大鼠外周血、脾脏、肝肿瘤组织中CD4~+CD25～+Foxp3～+调节性T细胞动态变化与肝内胆管癌发生发展之间的关系.方法 实验组大鼠40只,每日饮用0.03%硫代乙酰胺溶液,对照组大鼠40只,正常饮水.自诱癌第10周起至第24周,每隔2周处死实验组及对照组大鼠各5只,流式细胞仪检测外周血、脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞数量,免疫组织化学法检测组织内Foxp3蛋白表
目的 观察肝细胞癌(HCC)中Wnt信号通路相关基因的表达状态,探讨HCC与该信号通路的关系.方法应用基因芯片对5例HBV感染相关HCC癌和癌旁组织进行检测,并采用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术对芯片筛选结果进行验证.结果芯片(含126个Wnt信号途径相关基因)杂交结果显示,对比癌旁组织,癌组织内3组以上同时出现上调的基因数为7个(5.56%),其中Fzd2基因在4组出现明显上调
大鼠胆总管结扎(BDL)模型已有描述,并提出胆道梗阻的急性期是胆管结扎后1周~`[1].本研究详述BDL后不同时间点相关变化,为急性胆道梗阻模型的建立提供实验依据。
目的 探讨乳腺癌中脾酪氨酸激酶(Syk)蛋白表达对血管内皮生长因子(VEGF)-C、VEGF-D表达的影响及对淋巴管生成的影响.方法 随机选取30例无淋巴结转移、30例有淋巴结转移的乳腺癌组织及10例乳腺腺病组织标本,采用免疫组织化学染色法检测Syk、VEGF-C、VEGF-D的表达,并检测计数淋巴管密度(LVD).结果 Syk在乳腺癌中的阳性表达率明显低于乳腺腺病组织(P＜0.01),VEGF-