【摘 要】
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目的研究Kex2（EC.3.4.21.61）蛋白酶在毕赤酵母中的重组表达、纯化和部分性质。方法 Kex2基因整合进p PIC9K质粒中,通过电转构建重组毕赤酵母GS115-Kex2,G418筛选多拷贝子,甲醇
【机 构】
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生物反应器工程国家重点实验室、华东理工大学
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目的研究Kex2（EC.3.4.21.61）蛋白酶在毕赤酵母中的重组表达、纯化和部分性质。方法 Kex2基因整合进p PIC9K质粒中,通过电转构建重组毕赤酵母GS115-Kex2,G418筛选多拷贝子,甲醇诱导得到目的蛋白。通过强阴离子交换层析Q-FF对重组蛋白进行纯化,对纯化后的蛋白进行酶学性质研究。结果通过毕赤酵母表达可以得到具有活性的重组Kex2蛋白酶,以Boc-Gln-Arg-Arg-p NA（叔丁氧羰-谷氨酰胺-精氨酸-精氨酸-对硝基苯胺,Boc-QRR-p NA）为底物检测酶的活性,发酵外液
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