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目的建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞（HUVEC）且操作方便的体外培养方法。方法采用不同浓度的Ⅱ型胶原酶（0．05％，0．1％和0．2％）对HUVEC进行灌注；进行灌注，并分别孵育不同的时间（10min，13min，15min和18min）进行消化，观察细胞的形态、数量以及生长融合情况。结果采用0．1％的胶原酶消化10-13min为最佳条件，经光学显微镜观察培养的细胞数量较多，生长、繁殖状态良好，培养3d左右细胞可达到融合状态。结论本实验建立的胶原酶法消化HUVEC培养方法简便，细胞获得量较多且生长状态