β-arrestin2抗基因RNA表达载体的构建及其基因沉默效应鉴定

来源 :医学研究生学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:coconutt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 吗啡耐受与神经元μ阿片受体持续脱敏感化有关,而μ阿片受体调控蛋白β-arrestin2在其中起着关键性作用,因此β-arrestin2有可能成为抑制吗啡耐受状态的有效靶点.文中构建携带β-arrestin2抗基因RNA的表达载体pGPU6/GFP/agRNAs,并评价其用于基因沉默研究的可行性. 方法 根据β-arrestin2基因转录起始位点序列,从-14处开始至+13处结束,每隔一个碱基,依次合成9条21个碱基长度的抗基因RNA片段,并分别构建入质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo.利用脂质体Lipofectamine介导的基因转染技术,分别将各个表达载体转染NG108-15细胞,于转染后第5天分别取转染不同抗基因RNA片段的细胞提取总RNA,应用realtime PCR和Western blot检测细胞β-arrestin2的表达,评价其基因沉默效应. 结果 筛选出1个表达具有基因沉默效应的抗基因RNA表达载体pGPU6/GFP/Arrb9.Realtime PCR结果显示NG108-15细胞转染该片段后,β-arrestin2 mRNA和蛋白表达水平均下降(P<0.05),下降程度达95%. 结论 携带β-arrestin2抗基因RNA的表达载体可有效下调NG108-15细胞β-arrestin2的表达,实现基因沉默效应.
其他文献
目的:探讨优质护理干预对急性心肌梗死患者(Acute Myocardial infarction,AMI)心理健康和护理满意度的影响.方法选取我院2016.1-2016.12间收治的80例AMI患者,入院即给予优质
目的 探讨全髋关节和人工股骨头置换术在治疗高龄患者股骨颈骨折方面的安全性与临床效果.方法 选取我院收治的94例股骨颈骨折的高龄患者病历资料,根据手术方式的不同,分为A组
目的:探讨重型颅脑外伤患者人工气道的护理方法.方法:严遵无菌操作原则,确保患者呼吸道的畅通,加强呼吸功能的训练,以及人工气道的管理.结果:30例患者中,拔除气管套管23例,76
目的 探讨经尿道前列腺电切术的护理操作方法 .方法选择103例需要行经尿道前列腺电切术治疗的患者作为受试对象,在围手术期给予综合护理干预操作.对比护理前后心理状态改善情
目的:观察在艾滋病患者中引入舒适护理模式的效果,并分析其应用价值.方法:选取82例艾滋病患者展开对照研究,随机分为常规组与舒适组,均接受常规方法护理,且舒适组另接受舒适
目的 研究经阴道彩色多普勒超声与经腹彩色多普勒超声在早期异位妊娠诊断中的准确性差异.方法 收集了2014年3月~2016年3月我院收治的早期异位妊娠患者110例的临床资料,其中接
环丙沙星是新一代含氟喹诺酮类药物,抗菌谱广,对革兰氏阳性菌、阴性菌和对β-内酰胺抗生素产生耐药性的细菌都高度敏感,对分枝杆菌、厌氧菌和衣原体亦敏感,在前列腺中的浓度
目的 观察分析糖皮质激素联合阿昔洛韦治疗老年带状疱疹的临床疗效.方法 选取2014年6月~2016年9月在我院就诊治疗的老年带状疱疹患者106例,并采用随机数字表法随机分为对照组
目的:分析哺乳期乳腺脓肿行负压封闭引流手术治疗的临床疗效及护理效果.方法:选取于2014年1月-2016年10月在本院收治并确诊的哺乳期乳腺脓肿共115例,随机分为观察组及对照组,