【摘 要】
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以福禄桐叶片为试材,采用正交实验和单因子试验,分析模板DNA、Mg2+、Taq酶、引物和dNTP五个因子对福禄桐ISSR-PCR反应的影响。结果表明:福禄桐ISSR-PCR最佳反应体系为在25μL
【机 构】
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国家林业局桉树研究开发中心,江西农业大学园林艺术学院,
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以福禄桐叶片为试材,采用正交实验和单因子试验,分析模板DNA、Mg2+、Taq酶、引物和dNTP五个因子对福禄桐ISSR-PCR反应的影响。结果表明:福禄桐ISSR-PCR最佳反应体系为在25μL反应体系中,模板DNA为15ng,Mg2+3.0mmol/L,Taq酶0.5U,引物0.6μmol/L,dNTP 0.20mmol/L,通过梯度PCR试验得到相应引物最佳退火温度为47℃;该试验可为福禄桐遗传多样性分析和亲缘关系等提供理论基础。
The effects of template DNA, Mg2 +, Taq enzyme, primer and dNTP on the ISSR-PCR reaction of P. fortunei were studied by orthogonal test and single factor test. The results showed that the optimal reaction system of ISLR for P. fortunei was 15ng, 3.0mmol / L of Mg2 +, 0.5U of Taq DNA, 0.6μmol / L of primer and 0.20mmol / L of dNTP in a 25μL reaction system The optimal annealing temperature of the corresponding primers obtained by gradient PCR was 47 ℃. This experiment can provide the theoretical basis for the analysis of genetic diversity and genetic relationship of Flowulin.
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