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目的 构建霍乱肠毒素A亚单位基因(ctxA)真核表达重组质粒,并在NIH3T3细胞中进行表达。方法 用限制性核酸内切酶从重组质粒pET32a—ctxA上切下ctxA基因,导入真核表达载体peDNA3.1(+).重组子pcDNA3.1-ctxA经限制性酶切分析、PCR鉴定和序列测定正确后,用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-ctxA转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光法和Westernblot对peDNA3.1-ctxA的瞬时表达产物和稳定表达产物进行鉴定。结果 重组质粒peD—NA3.1-ctxA成功转入