【摘 要】
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目的 建立了一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原的方法,通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,再用Tris-HC1缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行
【机 构】
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广东省医学实验动物中心,佛山528248
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目的 建立了一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原的方法,通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,再用Tris-HC1缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、使用醋酸进行复溶进行鼠尾胶原的纯化.超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白.通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定,本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯.与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异.研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量：1∶500,酶解时间：72h,盐析浓度：2mol/L,提取所用酸溶液：0.05 mol/L醋酸溶液.为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础.
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