【摘 要】
：
目的：建立快速、敏感、特异检测鼠痘病毒的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法.方法：针对鼠痘病毒血凝素HA基因设计特异性引物和探针,构建含有HA基因的标准质粒进行定量分析,建立TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,评价其敏感性、特异性和稳定性.对临床标本中的鼠痘病毒进行检测.结果：研究结果显示,建立的鼠痘病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法特异性为100％
【机 构】
：
中国食品药品检定研究院,北京 100050
【出 处】
：
2017年第十五届中国北方实验动物科技年会
论文部分内容阅读
目的：建立快速、敏感、特异检测鼠痘病毒的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法.
方法：针对鼠痘病毒血凝素HA基因设计特异性引物和探针,构建含有HA基因的标准质粒进行定量分析,建立TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,评价其敏感性、特异性和稳定性.对临床标本中的鼠痘病毒进行检测.
结果：研究结果显示,建立的鼠痘病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法特异性为100％,与其他正痘病毒属病毒、非正痘病毒属病毒、细菌、真菌、寄生虫和细胞均无交叉反应.该技术灵敏度高,能精确定量检测鼠痘病毒DAN线性范围达10个数量级(100～109拷贝),最低检测限度为4拷贝.该方法重复性非常好,组内变异系数和组间变异系数均小于1％.测试中相关系数、斜率和效率测量线性没有显著变化,表明该方法准确度高、精密度好.将其成功应用于临床标本中鼠痘病毒载量的定量检测,用普通PCR和测序进行确证.整个检测过程可在2h内完成,可以用作快速诊断方法.
结论：本研究新建立的鼠痘病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR方法,具有快速简便、特异性强、灵敏度高的特性,适用于动物源性产品中鼠痘病毒检测、食品和药品安全检查、环境监测、流行病学调查,为临床标本中鼠痘病毒的快速定量检测提供了一种特异有效的评价工具,值得推广应用.
其他文献
Endoscopic ultrasound(EUS), developed in the 1980 s, was initially predominantly used for guidance of fine needle aspiration; the last 25 years, however, have w
人呼吸道合胞病毒Ｇ糖蛋白基因在鼠伤寒沙门菌中的表达［英］／［Ｍａｒｔｉｎ－Ｇａｌｌａｒｄ．Ａ．．．ＪＧｅｎＶｉｒｏｌ．－１９９３，７４．－４５３～４５８］人呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）附着蛋白Ｇ的分子量为８４Ｋ到９０Ｋ，它的Ｎ－端和Ｏ－端联接高含量的碳水...
Expression of human respiratory syncytial v
将我院56例儿童尸检病理资料进行统计分析，#对近几十年儿童致死性疾病的变化及诊断符合率子以探讨。材料与方法取自我院1958年12月至1992年6月间501例尸检材料中，1岁至16岁儿童
对于转移性结直肠癌的原发灶切除术,还存在很大的争议。之前的研究表明,5-氟尿嘧啶(5-FU)一线化疗使患者发生肿瘤原发灶相关并发症的风险很低。但是,一线联合化疗对原发
The
采 访是什么？记者应该怎样采访？怎样 与采访对象交往？熊高著《采访行为学概论》（人民出版社２０００年６月第１版）以人的“需要”为起点，结合中外百年间近百名新闻学者、知名记者的采访论述、采
白羊座Aries(3.21-4.20)本月白羊座工作上找异性一同搭档,似乎做起事来会更顺心愉快。彼此搭配时也较能以不同角度看待事物,互相提出的意见颇有互补作用喔。相对的,如果是对
硬要骑在父亲肩头，让他给我当木马时，他笑道：“现在我让你骑，长大了我可就禁不住你骑了啊。”我一本正经地说：“等我长大了，我让你骑，我驮着你去公园玩儿！”结果，我真的长大了，却别说让他骑，就连好好陪他走一圈公园都没有过。 向母亲要学费时，母亲皱着眉头，独自唠叨着：“现在读书可真贵，想当初我们才要几毛钱呢！”接着，无奈地对我说：“你要好好读书，将来才有出息。”我接过钱，大声地说：“我一定好好读书！等
我和男友张阳交往快半年了,一个月前我们开始同居。张阳对我生活的方方面面照顾得都非常周到,作为一个从小在父母的庇护下长大的女孩,我在离家求学了几年之后,又找回了那种与
上期回须:苦读之下,阿音的成绩稳步提高,在一次考试中语文成绩甚至反超了张贤,成为班级第一名。6月9日,在这个普通又特别的日子里,高三生结束了高考的最后一门考试。阿音突然
基于黏弹性动力人工边界理论,考虑结构—地基动力相互作用,分别分析了系统频率与楼层反应谱,揭示了成层地基对核电厂竖向动力特性的影响。计算结果表明,核电厂竖向反应谱更易