【摘 要】
：
为了研究小麦抗赤霉病相关UDP-葡萄糖基转移酶TaUGT6基因的功能,利用TaUGT6基因的编码区构建了原核表达载体pGEX-TaUGT6,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株后,经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达对培养温度、培养时间进行了探索;然后利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测重组蛋
【机 构】
：
西藏农牧学院植物科学学院,林芝, 860000;江苏省农业科学院粮食作物研究所,南京, 210014;江苏省农业科学院粮食作物研究所,南京, 210014;西藏农牧学院植物科学学院,林芝, 86000
论文部分内容阅读
为了研究小麦抗赤霉病相关UDP-葡萄糖基转移酶TaUGT6基因的功能,利用TaUGT6基因的编码区构建了原核表达载体pGEX-TaUGT6,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株后,经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达对培养温度、培养时间进行了探索;然后利用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)检测重组蛋白,进行蛋白纯化.结果表明:TaUGT6的编码区为1473 bp,导入大肠杆菌的TaUGT6基因能够被诱导表达,重组蛋白在25℃经过夜诱导和37℃经6 h诱导效果较好,表达重组蛋白的表现分子量与理论分子量基本一致,利用蛋白层析系统获得了纯度较高的重组可溶性蛋白.本研究为今后通过体外酶活分析、抗体制备等方法深入研究该基因的功能提供了依据.
其他文献
为了明确大豆生长过程中根际土壤真菌群落组成及其影响因素,选取黑龙江省农业科学院生态试验田中栽培品种‘绥农36号’(ZP)和野生品种(Y1)2种大豆,采用Illumina MiSeq高通量测序技术分别对种植前期(Pp)、分枝期(Bp)、开花结荚期(Fp)和成熟期(Mp)的根际土壤进行ITS rDNA测定,同时,对以上各时期的土壤理化性质以及真菌群落结构的相关性进行分析.结果表明:从生长期到收获期,真菌多样性和丰富度整体表现为逐渐增多,在收获期时达到较高.测序结果表明,担子菌门(Basidiomycota)和
为研究不同华南类型黄瓜组合接种白粉病菌的生理变化,以5个华南类型杂交组合为试验材料,在接种白粉病菌后0、1、3、6、9d对叶片的病情指数、叶绿素含量、防御酶活性及渗透调节物质含量变化进行研究,并分析了这些生理指标变化与黄瓜白粉病抗性之间的关系.结果表明,根据病情指数对5个黄瓜杂交组合进行抗性分级,18C-3为抗病,18C-2和18C-4为中抗,18C-1和18C-5为感病;5个黄瓜组合接种白粉病菌后,叶绿素含量下降,抗病组合18C-3的叶绿素含量高于其他组合;大部分组合叶片内的超氧化物歧化酶(SOD)、过
草莓果实发育关键基因在草莓果实发育和成熟过程中具有重要作用,同时在分子育种与遗传改良方面也具有重要意义.本研究运用罗氏UPL通用探针检测技术对草莓基因FaNCED1,FaPG,FaEXP5和rnFaDFR在不同器官及果实的不同发育时期的表达状况进行了定量分析.结果显示,FaPG,FaEXP5均在果实发育后期表达量显著提高,并且FaPG具有显著的果实特异性表达;4个基因在果实发育的各个时期都有表达,但表达模式不同.在果实发育的每个时期,FaDFR与其他基因相比均呈现较高的表达水平.本研究为草莓果实发育关键基
为了分析中国化学调控技术对玉米的增产效果,本研究以喷施清水为对照,通过检索并筛选获得25篇有效文献,78组相关田间试验数据样本,将数据按照省/自治区、试验时间、玉米品种、种植密度、化控剂类型、喷施剂量和喷施期进行分组,利用Meta分析法定量研究中国化学调控技术对玉米的产量效应和影响因素.结果表明:应用化学调控技术可以有效提高玉米产量,平均增产量为570.489 kg/hm2,95％置信区间为413.595～727.382 kg/hm2,且数据不存在发表偏倚和极端值.选用紧凑型玉米高密度种植,在穗期喷施较低
bHLH(Basic/helix-loop-helix)转录因子具有螺旋-环-螺旋结构,在植物中参与调控植物体生长发育、信号传导和抗逆生理等过程.澳洲坚果含有丰富的具有药用和保健价值的营养物质,但其产量和品质问题影响了澳洲坚果产业在中国的发展.为分析bHLH家族成员在澳洲坚果产量形成中的结构与功能,本研究采用电子克隆技术对MibHLH48进行组装拼接,并利用生物信息学方法对其结构进行分析预测.结果表明,MibHLH48cDNA全长为1 838 bp,开放阅读框的长度为669 bp,共编码222个氨基酸;M
为促进氮肥的合理利用,本研究采用基质培养法,营养液定量浇灌,分析了正常施氮量的60％、80％、90％、100％、120％和140％等6个氮素水平下加工型辣椒的干物质积累和氮素吸收特性.结果表明,随着施氮水平的提高,叶片干重、果实干重、茎干重、根干重和植株干重呈不断增加趋势,各部位氮含量在80％～100％施氮水平范围达到最大值,90％施氮水平下的叶片干重、根干重和果实干重,以及各部位氮含量和氮积累量都与100％、120％和140％氮素水平下无显著差异;相关性分析表明,氮积累量与叶片干重、茎干重、果实干重、根
生长和休眠是多年生植物生命周期中两个重要的生物过程,研究休眠相关的性状对认识林木生长适应性以及提高植物分子育种效率具有重要意义.为了揭示杨树驻芽的遗传机制,本研究以美洲黑杨(Populusdeltoides)和小叶杨(Populus simonii)杂交的F1代群体为实验材料,基于该群体已构建的高密度遗传图谱,利用MapQTL软件中的KW方法对驻芽时间进行了 QTL定位.结果在7个连锁群上共检测到15个与杨树驻芽时间相关的QTL,其中12个QTL位于美洲黑杨连锁群LG-1、LG-7、LG-9、LG-11和
S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(S-adenosylmethionine decarboxylase,SAMDC)是生物体内亚精胺合成过程中的限速酶,在植物生长发育及抗逆境胁迫方面起到重要的调节作用.本研究通过RT-PCR技术从大白菜栽培种Chiifu-401中克隆得到一个BrSAMDC基因,并对其进行表达特性及其蛋白的结构与功能进行生物信息学分析.结果表明,BrSAMDC的cDNA扩增序列为1566 bp,CDS区为1107 bp,编码368个氨基酸.定量PCR结果显示,BrSAMDC基因在白菜的各个组织均有较
随着二代测序技术的发展,其在基因分型、连锁图谱构建、QTLs定位、系统进化、生物多样性、全基因组关联等生物研究领域中的应用越来越广泛.为了降低测序成本,采用一套简化测序的数据已经能满足大多数生物学研究.本研究主要从基于限制性内切酶简化基因组测序的2种主要技术(RAD-seq和GBS)进行介绍,从其原理、测序群体选择、限制性内切酶筛选、测序后数据分析等方面予以阐述.目前,GBS技术以其过程简单且使用甲基化敏感酶回避了基因组重复区域成为了简化测序的主要技术,尤其适合大样本量的研究,可快速鉴定出高密度的变异,加
油棕(Elaeis guineensis Jacq.)享有“世界油王”的称誉,油棕中果皮的棕榈油(Palm oil)含量非常丰富,占干重的80％.众所周知,赤霉素(gibberellins,GAs)、生长素(Auxin)和乙烯(Ethane)是分布较广的植物激素,参与多种植物的油脂代谢和脂肪酸积累过程,且这3种激合成相关基因素在油棕中的研究鲜有报道.基于前期对非洲油棕果壳转录组基础上,本研究针对油棕赤霉素相关基因EgGA20ox 1-D和EgGA20ox 2,生长素相关基因EgYUC1和乙烯相关基因EgA