链置换扩增技术的影响因素研究

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wkylyf001
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目的:探索限制酶、聚合酶、缓冲体系和DTT等对链置换扩增(SDA)实验的影响,以期在商品化试剂条件下组建SDA系统.方法以结核菌IS6110序列为扩增对象设计SDA引物,利用商品化的BsoBI和exo-Bst为实验用酶建立SDA实验系统.对比在不同BsoBI、exo-Bst浓度条件下SDA产物的电泳条带亮度来观察限制酶、聚合酶对SDA效率的影响;对比SDA在pH 7.6的磷酸盐缓冲液和以Tris-HCl为缓冲体系的NE Buffer2、ThermoPol Buffer和EcoPol Buffer中的产物电
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