【摘 要】
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目的 探讨维生素D信号通路对反复种植失败（RIF）患者子宫内膜容受性的影响及可能的作用机制。方法 收集2019年5月至2021年2月于海南省妇女儿童医学中心就诊的30例RIF患者为RIF组，选择同期因输卵管和/或男性因素接受IVF-ET治疗，并在子宫内膜活检采集后的移植周期中实现临床妊娠的30例女性作为对照组。分别于自然月经周期黄体生成素高峰后7 d（对照组）或激素替代疗法（HRT）周期服用孕酮后
【基金项目】
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海南省卫生计生行业科研项目（20A200035）；
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目的 探讨维生素D信号通路对反复种植失败（RIF）患者子宫内膜容受性的影响及可能的作用机制。方法 收集2019年5月至2021年2月于海南省妇女儿童医学中心就诊的30例RIF患者为RIF组，选择同期因输卵管和/或男性因素接受IVF-ET治疗，并在子宫内膜活检采集后的移植周期中实现临床妊娠的30例女性作为对照组。分别于自然月经周期黄体生成素高峰后7 d（对照组）或激素替代疗法（HRT）周期服用孕酮后5 d（RIF组）收集两组患者的子宫内膜组织与外周血的血液样本；体外细胞实验选择人子宫内膜间质细胞（hESCs）SCRC-2002细胞系。免疫组织化学染色法检测VD代谢酶CYP27B1和VD受体（VDR）在子宫内膜组织中的表达；利用孕酮（P4）与二丁酰环磷酸腺苷（cAMP）联合诱导法使hESCs发生蜕膜化；将携带沉默VDR（sh-VDR）与对照序列（sh-NC）的慢病毒载体转染至hESCs中，并将细胞分为：cAMP+P4+sh-NC组、cAMP+P4+sh-NC+VD组和cAMP+P4+sh-VDR+VD组，RT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素（PRL）和胰岛素生长因子结合蛋白（IGFBP1）mRNA表达；P4处理转染后的hESCs,并将细胞分为：sh-NC组、P4+sh-NC组、P4+sh-NC+VD组与P4+sh-VDR+VD组；CCK-8检测细胞的增殖能力；Western blotting检测细胞中上皮细胞标志物β-Catenin、E-cadherin、ZO-1与间质细胞标志物N-cadherin、CLDN5蛋白表达水平。结果 与对照组相比，RIF组子宫内膜组织中CYP27B1和VDR的mRNA和蛋白表达均显著降低（P＜0.05）。与cAMP+P4+sh-NC组相比，cAMP+P4+sh-NC+VD组中PRL与IGFBP1的mRNA表达显著升高（P＜0.05）,cAMP+P4+sh-VDR+VD组中PRL与IGFBP1的mRNA表达显著降低（P＜0.05）。与sh-NC组相比，P4+sh-NC组、P4+sh-NC+VD组和P4+sh-VDR+VD组细胞的增殖能力显著增强（P＜0.05）,细胞中β-Catenin、E-cadherin、ZO-1蛋白表达显著增加（P＜0.05）,N-cadherin、CLDN5蛋白水平显著降低（P＜0.05）。与P4+sh-NC组相比，P4+sh-NC+VD组细胞增殖能力与β-Catenin、E-cadherin、ZO-1蛋白表达显著增加（P＜0.05）,N-cadherin、CLDN5蛋白表达显著降低（P＜0.05）;P4+sh-VDR+VD组细胞增殖能力与β-Catenin、E-cadherin、ZO-1蛋白表达显著降低（P＜0.05）,N-cadherin、CLDN5蛋白表达显著升高（P＜0.05）。结论 RIF患者子宫内膜组织中VD代谢酶CYP27B1和VDR表达均降低；VD/VDR通路可能通过参与并促进hESCs在卵巢激素作用下的增殖与上皮样变过程，促进细胞的蜕膜化，从而增强子宫内膜的容受性，参与调控胚胎的植入。
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