论文部分内容阅读
目的 观察回阳生肌膏不同拆方益气温阳方和活血通络方对M1型巨噬细胞调控成纤维细胞表型的影响.方法 用丙二醇甲醚醋酸酯(2-Acetoxy-1-methoxypropane,PMA)、脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和干扰素γ(Interferon-γ,IFN-γ)刺激人单核细胞株(THP-1)转化为M1型巨噬细胞,分别加入不完全培养液、益气温阳方(4、0.8、0.16 mg/L)和活血通络方(32、6.4、1.28 mg/L)药物,24 h后收集培养上清液.依次将培养上清液加入到人成纤维细胞株(HSF),模型组加入M1型巨噬细胞上清液,益气温阳方、活血通络方分别加入高、中、低药物组M1型巨噬细胞上清液,空白组或对照组加入HSF细胞培养液.采用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)方法观察细胞增殖情况;luminex法检测上清液中趋化因子2(C-C motif chemokine ligand 2,CCL2)、趋化因子7(C-C motif chemokine ligand 7,CCL7)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)和基质金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 1,TIMP-1)的含量;realtime-PCR法检测细胞内CCL2、CCL7、IL-6、MMPs、TIMP-1、Ⅰ 型胶原蛋白基因α1(collagen type Ⅰalpha gene,COL1A1)和Ⅲ型胶原蛋白基因α 1(collagen type Ⅲ alpha gene,COL3A1)mRNA的表达.结果 与模型组相比,益气温阳组和活血通络组各剂量组均可促进HSF细胞增殖;抑制HSF细胞炎症因子CCL2、CCL7、IL-6的分泌及其mRNA的表达(P＜0.01);抑制HSF细胞基质金属蛋白酶1(matrix metalloproteinase 1,MMP-1)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP-3)的分泌及其mRNA的表达(P＜0.01),促进TIMP-1的分泌及mRNA的表达(P＜0.01),抑制MMP-3 mRNA的表达(P＜0.01);促进HSF细胞COL1A1和COL3A1 mRNA的表达(P＜0.01).结论 益气温阳方主要促进成纤维细胞增殖,抑制HSF细胞炎症因子和MMPs的分泌蛋白及mRNA的表达,促进基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,TIMPs)的分泌和mRNA表达,以促使创面成纤维细胞活化,而活血通络方主要促进成纤维细胞胶原生成,促进其向肌成纤维细胞转化,两方相辅相成,共同促进创面愈合.