【摘 要】
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目的通过结核分枝杆菌(M.TB)强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra胞外蛋白表达的比较,寻找差异蛋白并为下一步研究M.TB的毒力因子提供思路.方法 M.TB H37Rv和H37Ra菌株分别在苏通液体培
【基金项目】
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解放军309医院基金;国家重点基础研究发展计划(973计划)
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目的通过结核分枝杆菌(M.TB)强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra胞外蛋白表达的比较,寻找差异蛋白并为下一步研究M.TB的毒力因子提供思路.方法 M.TB H37Rv和H37Ra菌株分别在苏通液体培养基培养3周后提取胞外蛋白并定量,第一向电泳是用pH3~10线性IPG预制胶条进行等电聚焦,第二向电泳是用SDS-PAGE凝胶再分离蛋白.银染PAGE凝胶、干燥,用ImageScanner扫描凝胶,ImageMaster 2D Elite 3.10(图像分析软件)分析2D图像.结果 H37Rv和H37Ra胞外蛋白的斑点大部分在酸性区域(pI小于7.0).在极碱性区域(pI大于9.0),两者胞外蛋白的斑点数极少.在小分子区域可明显发现H37Rv有3个蛋白斑点在H37Ra中缺失.结论二维凝胶电泳技术是目前有效分离蛋白质的重要途径之一.
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