【摘 要】
：
根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因（Cap）,用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21（DE3）进行融合表达,
【机 构】
：
浙江大学动物预防医学研究所,龙岩学院生物科学与工程系
【基金项目】
：
国家自然科学基金（30771608）,浙江省科技计划重点项目（2007C22051）
论文部分内容阅读
根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因（Cap）,用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21（DE3）进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学分析确定Cap蛋白的核定位信号区域,新设计一对引物扩增出不包含核定位信号序列编码区的核衣壳蛋白基因,将截短Cap基因克隆入pET-28a进行融合表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,截短Cap蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分
其他文献
从临床疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑组织病料中，经聚合酶链式反应（PCR）证实为猪伪狂犬病病毒（PRV）野毒感染，采用无PCV1污染的猪肾细胞系（PK-15）分离培养，经蚀斑克隆纯化，培育1株细胞培养
为研究大肠杆菌多重耐调控基因SdiA与不同动物源性及多重耐药水平之间的关系，选取，临床分离的不同动物源性大肠杆菌5株及大肠杆菌药敏质控株ATCC25922，在对其进行主要治疗药物耐
将表达鸡IFN-γ基因和传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒（rFPV-IFN-γ S1）接种SPF鸡后，用与S1基因亲本毒株具有相同致病型且遗传关系较近的现地分离株LHLJ04XI病毒进行攻
将EIAV驴白细胞弱毒疫苗株在驴胎皮肤细胞中连续传代,分别提取第13代、18代、21代、23代、26代病毒培养物的前病毒DNA,以LTR特异性引物PCR扩增前病毒LTR,并进行克隆及测序分
通过对孵化率、平均囊指数、脾指数、外周血淋巴细胞增殖反应和白介素18（IL-18）蛋白水平表达的检测，评定了重组鸡真核表达质粒（pCI-ChIL-18）胚胎接种的不同接种剂量和接种方法的效
本研究在已有H5亚型禽流感病毒特异性单抗基础上，建立了以多抗作为包被抗体、单抗作为检测抗体的抗原捕捉ELISA方法。通过对各个反应条件进行优化，获得的最佳工作条件为：羊血清1
为建立副猪嗜血杆菌（Hps）的感染动物模型，本试验用Hps血清5型标准菌株（Nagasaki），以2．0×10^9CFU剂量腹腔感染豚鼠，观察豚鼠发病及死亡情况。取死亡豚鼠的主要器官组织，观察其病理
参照GenBank中所收录的猪轮状病毒OSU株序列设计了一对特异性引物，RT-PCR扩增出1062bp的vp7全长基因，与参考OSU序列的核苷酸同源性达99.8％，克隆到pMD18-T载体中，获得pMD18-T-VP7阳
细菌“活的非可培养状态” （Viable but non-culturable state, VBNC） 自80年代徐怀恕等人提出以来，引起了微生物学各领域的极大关注，这不仅为环境中微生物多样性的发展提供了新
本实验对E．tenellaZJ株的3-1E基因进行了克隆和表达。根据已报道的柔嫩艾美尔球虫3-1E基因序列设计引物，以孢子化卵囊总RNA为模板，用RT—PCR方法扩增得到一条特异片段，将扩增产物