【摘 要】
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目的:探讨回阳生肌汤对糖尿病小鼠创面愈合的作用及可能的机制.方法:10只db/m小鼠为空白对照组,30只db/db糖尿病小鼠随机分为模型组、回阳生肌汤组和重组人碱性成纤维细胞生
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81774328,No.81774312,No.81804093)。
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目的:探讨回阳生肌汤对糖尿病小鼠创面愈合的作用及可能的机制.方法:10只db/m小鼠为空白对照组,30只db/db糖尿病小鼠随机分为模型组、回阳生肌汤组和重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)组;各组小鼠在造模前称重、检测血糖,背部全层皮肤切除直径为6 mm的创面,外用药物贴敷,隔天换药,创面拍照并计算创面面积.造模7 d后取小鼠背部皮肤组织,采用苏木素-伊红染色观察组织病理学改变;多重免疫荧光染色检测创面组织促炎型(M1型)和抗炎型(M2型)巨噬细胞的数量;蛋白芯片技术检测M1型和M2型巨噬细胞相关蛋白的表达水平;流式细胞术检测小鼠骨髓和血液中总单核细胞、抗炎型单核细胞(Ly6Clow/-)和促炎型单核细胞(Ly6Chi/+)占总活细胞的比例.结果:db/db小鼠体重和血糖显著高于db/m小鼠(P＜0.01).与模型组相比,回阳生肌汤干预可显著提高db/db小鼠创面愈合率(P＜0.01),促进肉芽组织新生,丰富成纤维细胞和血管.多重免疫荧光染色显示,与模型组相比,回阳生肌汤组M1型巨噬细胞数量减少,M2型巨噬细胞增多(P＜0.01).蛋白因子芯片结果显示,回阳生肌汤能抑制白细胞介素1β(IL-1β)、IL-1α、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNF-RⅡ)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达(P＜0.05或P＜0.01).流式细胞术结果显示,与模型组相比,回阳生肌汤组骨髓总单核细胞和Ly6Clow/-单核细胞比例升高,Ly6Chi/+单核细胞比例下降(P＜0.05或P＜0.01),血液中总单核细胞和Ly6Chi/+单核细胞比例下降,Ly6Clow/-单核细胞比例升高(P＜0.01).结论:db/db糖尿病小鼠血糖升高,创面愈合迟缓;回阳生肌汤可提高db/db糖尿病小鼠创面愈合率,减轻创面炎症反应,其机制可能是调节骨髓和血液中Ly6Clow/-/Ly6Ch/+单核细胞平衡,抑制Ly6Chi/+促炎型单核细胞向创面局部募集,促进Ly6Clow/-抗炎型单核细胞募集,从而减少创面中血液来源的M1型巨噬细胞,增加M2型巨噬细胞.
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