【摘 要】
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为了探讨不同预处理及分离方法提取山羊血浆外泌体的效果，试验利用过滤膜对采集的血浆样品进行预处理后分为0.22μm过滤组、0.45μm过滤组和0.80μm过滤组，同时设置未过滤组，然后采用超速离心法和试剂盒法提取不同预处理组的血浆外泌体，通过透射电子显微镜、纳米粒径分析仪及Western-blot方法对血浆外泌体的形态、大小及标志蛋白的表达进行分析。结果表明：超速离心法和试剂盒法提取的血浆外泌体的粒
【基金项目】
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广东省自然科学基金项目（2021A1515010636）； 广东省现代农业产业技术体系项目（20022KJ127）； 韶关市仁化县牛羊产业园山羊养殖技术服务项目（h20220665）；
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为了探讨不同预处理及分离方法提取山羊血浆外泌体的效果，试验利用过滤膜对采集的血浆样品进行预处理后分为0.22μm过滤组、0.45μm过滤组和0.80μm过滤组，同时设置未过滤组，然后采用超速离心法和试剂盒法提取不同预处理组的血浆外泌体，通过透射电子显微镜、纳米粒径分析仪及Western-blot方法对血浆外泌体的形态、大小及标志蛋白的表达进行分析。结果表明：超速离心法和试剂盒法提取的血浆外泌体的粒径大部分分布在30～200 nm之间；外泌体的结构完整，大小不一，呈圆盘状或茶托样，并且0.22μm过滤组采用超速离心法提取的外泌体在透射电子显微镜下的形态最清晰；0.80μm过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体纳米粒径显著大于超速离心法（P＜0.05）,未过滤组及不同过滤组采用试剂盒法提取的血浆外泌体蛋白浓度显著高于超速离心法（P＜0.05）;不同预处理及分离方法提取的血浆外泌体表面均有标志蛋白TSG101、CD63、CD9的表达。说明经0.22μm过滤膜预处理并结合超速离心法提取的血浆外泌体纯度最高，经0.80μm过滤膜预处理并结合试剂盒法提取的血浆外泌体产量最高。
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