【摘 要】
：
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调控作用,及对血小板源生长因子(PDGF)诱导的气道上皮细胞转分化(EMT)的影响.方法 取人气道上皮细胞株16-HBE,分为对照组、PDGF不同浓度刺激组(5、25、50、100、200 ng/L),用免疫荧光法检测各组细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)阳性表达,选出合适的PDGF诱导浓度.将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组(100 ng
【机 构】
：
716000 陕西省延安市,延安大学附属医院老年病科;716000 陕西省延安市,延安大学附属医院呼吸内科
论文部分内容阅读
目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对加速纤维肉瘤蛋白(Raf)/丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)/细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路的调控作用,及对血小板源生长因子(PDGF)诱导的气道上皮细胞转分化(EMT)的影响.方法 取人气道上皮细胞株16-HBE,分为对照组、PDGF不同浓度刺激组(5、25、50、100、200 ng/L),用免疫荧光法检测各组细胞EMT标志物波形蛋白(vimentin)阳性表达,选出合适的PDGF诱导浓度.将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组(100 ng/L)、AngⅡ不同浓度组(10-7、10-6、10-5 mol/L),用倒置显微镜检测细胞形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞EMT相关蛋白E-粘钙素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、vimentin,气道纤维化相关蛋白-纤维连接蛋白(FN)、胶原蛋白Ⅳ(ColⅣ),Raf/MEK/ERK通路相关蛋白Raf、MEK及磷酸化水平(p-MEK)、ERK及磷酸化水平(p-ERK)、转化生长因子β1(TGF-β1)等蛋白相对表达水平.将16-HBE细胞分为正常对照组、PDGF诱导组、AngⅡ组(10-6 mol/L)、Raf/MEK/ERK通路抑制剂(sorafenib)组(10μmoL/L)、AngⅡ+sorafenib(10-6 mol/L+10μmol/L)组,检测细胞形态及Raf/MEK/ERK通路相关蛋白表达.结果 PDGF不同浓度处理下,细胞vimentin阳性表达随浓度升高逐渐升高,并在100～200 ng/L时上升至稳定水平,选取100 ng/L为诱导浓度.AngⅡ不同浓度处理后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,细胞呈长梭形等改变,E-cadherin表达降低(P<0.05),α-SMA、vimentin、FN、ColⅣ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05);与PDGF诱导组比较,AngⅡ不同浓度处理组细胞长梭形改变进一步加重,E-cadherin表达进一步降低(P<0.05),α-SMA、vimentin、FN、ColⅣ、Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达进一步升高(P0.05).AngⅡ与sorafenib联合应用后,与正常对照组比较,PDGF诱导组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05).与PDGF诱导组相比,AngⅡ组细胞紧密连接减少,长梭形改变较多,Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达进一步升高(P<0.05),sorafenib组Raf、p-MEK/MEK、p-ERK/ERK、TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05).AngⅡ+sorafenib组上述指标变化与AngⅡ组相反,且差异有统计学意义(P<0.05).结论 AngⅡ可通过激活Raf/MEK/ERK通路表达,促进PDGF诱导的气道上皮细胞EMT进程.
其他文献
目的 探讨内皮抑素(ES)、凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)表达与慢性荨麻疹患者并发血管性水肿相关性及临床意义.方法 选取2020年8月—2021年8月收治的慢性荨麻疹118例,根据是否并发血管性水肿分为发生组54例和未发生组64例.比较2组ES、TSP-1及7日荨麻疹活动度评分(UAS7)、血管性水肿活动度评分(AAS),应用Pearson相关分析ES、TSP-1间及与UAS7评分、AAS评分的相关性,采用多因素Logistic回归分析并发血管性水肿的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面
目的 研究放射性粒子植入治疗对转移性胸腺瘤伴重症肌无力(MG)患者抗体表达及淋巴细胞亚群变化.方法 抽取2017年10月至2018年12月收治的转移性胸腺瘤伴MG患者共120例,将其遵照随机抽样法分成对照组[60例,施行三维适形调强放疗(3DIMRT)方式]和观察组(60例,施行放射性粒子植入治疗方式),研究比对患者的总缓解率、不良反应,以及不同治疗节点的肿瘤病灶大小、抗体表达情况与T淋巴细胞亚群变化等.结果 观察组总缓解率(81.67％)明显高于对照组总缓解率(53.33％),差异有统计学意义(P<0.
目的 研究miR-138-5p对糖尿病认知功能障碍小鼠神经炎症中的作用.方法 8周雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=15)、Curcumin治疗组(n=15)应用微阵列测序糖尿病认知障碍小鼠与正常对照组中小鼠海马中微小RNA的差异,应用qRT-PCR检测miR-138-5p在小鼠海马组织中的表达,生物信息学分析和双荧光素酶分析预测并验证miR-138-5p的靶基因.采用qRT-PCR、westernblot方法检测促炎性介质肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素
目的 探讨过表达miR-411对宫颈癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及机制.方法 以正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7为对照细胞,qRT-PCR检测宫颈癌Caski、SiHa和C-33A细胞miR-411表达.MTT法、Transwell小室及流式细胞术检测转染miR-411 mimics 48 h的SiHa细胞增殖、侵袭能力和凋亡率.通过双荧光素酶报告基因实验及miR-411 mimics/inhibitor对PIK3R3表达影响验证miR-411和PIK3R3靶向关系.将PIK3R3 siRNA及m
目的 探讨不同量肺泡灌洗液高通量测序在肺部感染中获取病原学的研究.方法 回顾性分析2016年7月至2018年10月送检的89例肺部感染患者,比较不同量肺泡灌洗液高通量测序获取病原学的阳性率;肺泡灌洗液高通量测序与传统细菌培养检测的阳性率、检测病原体的分布、病原体检测的准确性比较;肺泡灌洗液的高通量测序与传统培养获取病原学单一菌种和混合菌占比的比较.结果 89例患者中不同量肺泡灌洗液分为120 ml和60 ml,获取高通量测序结果阳性率(62.0％vs 60.0％)差异无统计学意义(P>0.05).肺泡灌洗
目的 探讨呼吸道感染患儿爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)-脱氧核糖核酸(DNA)载量表达及其与肝肾功能损伤的关系研究.方法 选取2016年1月至2020年6月门诊及病房住院治疗经临床确诊的呼吸道感染儿童175例为研究对象,依据EBV-DNA载量水平分为阳性组(n=117)和阴性组(n=58),比较不同性别、年龄的呼吸道感染患儿EBV-DNA阳性率,根据EBV-DNA载量将阳性组患儿分为EBV-DNA高载量组(n=21)、中载量组(n=35)和低载量组(n=61),比较不同EBV-DNA载量组患儿肝肾功能异常比
目的 探讨利拉鲁肽通过调控miR-15b-5p对高糖诱导的足细胞炎性反应和免疫功能的影响.方法 选择小鼠肾足细胞MPC-5经过葡萄糖诱导培养后,将细胞分组为对照(Con)组、高糖(HG)组、利拉鲁肽低、中、高剂量(HG+LIR-L、HG+LIR-M、HG+LIR-H)组、高糖+利拉鲁肽(HG+LIR)组、高糖+利拉鲁肽+anti-miR-NC、高糖+利拉鲁肽+anti-miR-15b-5p(HG+LIR+anti-miR-NC、HG+LIR+anti-miR-15b-5p)组.MTT检测细胞活力;ELIS
目的 探讨功能磁共振(MRI)引导下的重复经颅磁刺激(rTMS)对抑郁症短期疗效和执行功能的影响.方法 选取2019年11月至2020年3月收治的18～50岁的抑郁症患者59例,按随机数字表法随机分为MRI组、常规组和对照组,3组受试者均接受5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs)类药物治疗,在此基础上,MRI引导的重复经颅磁刺激组采用静息态磁共振扫描进行个体化定位(MRI组,19例),常规重复经颅磁刺激组采用传统的“5 cm定位法”(常规组,20例),rTMS刺激频率为10 Hz,刺激强度为100％运动阈值
目的 探讨miR-30a-5p通过调控组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激的影响及作用机制.方法 本研究通过体外培养心肌细胞H9 c2,建立缺氧复氧损伤细胞模型,细胞分组为:Control组、H/R组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-30a-5p组、H/R+si-NC组、H/R+si-HDAC9组、H/R+miR-30a-5p+pcDNA组、H/R+miR-30a-5p+HDAC9组.qRT-PCR检测miR-30a-5p和HDAC9 mRNA表达;Western
目的 探讨右美托咪定对大面积烧伤手术患者肺氧合和炎性反应的影响.方法 选择大面积烧伤切痂植皮手术患者40例,年龄20～60岁,ASA分级Ⅱ～Ⅲ级,烧伤总面积>30％,或Ⅲ度烧伤面积>20％,采用数字表法随机将患者分为右美托咪定组(Y组)和对照组(D组),每组20例.右美托咪定组麻醉诱导前静脉泵入右美托咪定0.5μg/kg,10 min泵入,然后以0.4μg·kg-1·h-1的输注速度至手术结束前10 min.对照组静脉泵入等量的0.9％氯化钠溶液.比较右美托咪定给药前(T0)、手术开始后1 h(T1),手