法舒地尔经Rho/ROCK通路影响尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成

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目的

探讨法舒地尔通过Rho/ROCK信号通路调控转化生长因子TGF-β1(TGF-β1)诱导的尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成的机制。

方法

体外分离培养人尿道瘢痕组织来源成纤维细胞,将其分为对照组、TGF-β1诱导模型组及法舒地尔组;采用CCK-8测定各组细胞的增殖情况,采用ELISA法测定细胞分泌Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)及纤维结合素蛋白(FN)的表达情况,采用Western blot法检测Rho相关蛋白激酶1、2(ROCK-1、ROCK-2)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。再用梯度浓度法舒地尔处理TGF-β1诱导的尿道瘢痕成纤维细胞模型,采用同样方法检测评估尿道瘢痕成纤维细胞表型转化及细胞外基质合成情况。

结果

TGF-β1诱导的细胞培养液随着TGF-β1浓度增加作用时间延长,其增殖活性增高,且5和10 ng/mL TGF-β1诱导的细胞增殖率均显著高于0 ng/mL(均P

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