【摘 要】
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目的探讨染料木素在延缓骨关节炎关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性以及分泌Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法用白细胞介素1β(IL-1β)处理
【机 构】
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浙江中医药大学附属第二医院,浙江中医药大学,杭州市富阳中医骨伤医院
【基金项目】
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浙江省医药卫生科技计划项目(2016KYA153)
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目的探讨染料木素在延缓骨关节炎关节软骨退变中对软骨细胞增殖活性以及分泌Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的影响。方法用白细胞介素1β(IL-1β)处理正常人软骨细胞形成骨关节炎模型,用染料木素及戊酸雌二醇处理骨关节炎软骨细胞,将细胞分为6组,A组:软骨细胞组(对照组);B组:软骨细胞+IL-1β处理组;C组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(25μg/ml)处理组;D组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(50μg/ml)处理组;E组:软骨细胞+IL-1β+染料木素(100μg/ml)处理组;F组:软骨细胞+IL-1β+戊酸雌二醇(100μg/ml)处理组。CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测各组collagenⅡ、MMP-13蛋白水平。结果①甲苯胺蓝染色显示,培养的软骨细胞呈异染性,证实为人软骨细胞。②正常人软骨细胞经浓度10ng/ml的IL-1β处理后,Western blot检测显示,MMP-13蛋白含量升高,collagenⅡ蛋白含量降低,差异有统计学意义(P<0.01),证实此种骨关节炎模型造模方法可行。③染料木素能显著增强骨关节炎软骨细胞的增殖活力,且与时间呈正相关,尤其是在72 h时,浓度为100μg/ml的染料木素对关节炎软骨细胞的增殖活性促进作用最强,差异有统计学意义(P<0.05)。④料木素能显著升高骨关节炎软骨细胞表达collagenⅡ的水平,降低MMP-13的水平。结论浓度为100μg/ml的染料木素处理关节炎软骨细胞在72 h时对细胞作用最为显著,能够增强软骨细胞活力,同时刺激collagenⅡ的合成分泌,抑制MMP-13的表达。
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