新型双功能谷胱甘肽合成酶的真核和原核表达

来源 :浙江大学学报:理学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jeanndy

【摘要】

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通过裂解无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)菌体细胞得到基因组DNA。根据GenBank上已发表的无乳链球菌(菌种编号ATCC13813)新型双功能谷胱甘肽合成酶基因(gshF)的核酸序

【作者】

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李佳慧杨芳芳王珍张赛南王首锋

【机构】

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浙江大学基础医学系,绿城农科检测技术有限公司,浙江省微生物生化与代谢工程省级重点实验室

【出处】

：

浙江大学学报:理学版

【发表日期】

：

2019年4期

【关键词】

：

新型双功能谷胱甘肽合成酶发酵表达谷胱甘肽 novel bifunctional glutathione synthetase fermentation ex

【基金项目】

：

国家发展和改革委员会微生物制造、绿色农用生物产品高技术产业化专项(20111158).

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通过裂解无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)菌体细胞得到基因组DNA。根据GenBank上已发表的无乳链球菌(菌种编号ATCC13813)新型双功能谷胱甘肽合成酶基因(gshF)的核酸序列与2种不同表达载体多克隆位点序列,分别设计引物F1、R1和F2、R2,再以总DNA为模板,经过特异性PCR扩增出长度约为2200bp的目的基因。随后分别对目的基因gshF和2种表达载体进行双酶切、连接等操作,得到表达载体pPIC9K-gshF与pET-gshF。用SalI线性化表达载体pPIC9

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