【摘 要】
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目的 观察肝素酶与非阳离子依赖型甘露醇-6-磷酸受体(CD222)在膀胱癌5637细胞中的结合及两者结合后对细胞侵袭性的影响.方法 应用免疫荧光双染方法研究肝素酶与CD222在膀胱癌5637细胞中定位及结合.设计、合成小干扰RNA(siRNA)-CD222,转染膀胱癌5637细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测转染效率.加入人重组肝素酶后采用Western b
【机 构】
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目的 观察肝素酶与非阳离子依赖型甘露醇-6-磷酸受体(CD222)在膀胱癌5637细胞中的结合及两者结合后对细胞侵袭性的影响.方法 应用免疫荧光双染方法研究肝素酶与CD222在膀胱癌5637细胞中定位及结合.设计、合成小干扰RNA(siRNA)-CD222,转染膀胱癌5637细胞.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法检测转染效率.加入人重组肝素酶后采用Western blot法检测转染前后CD222及磷酸蛋白激酶B(p-Akt)的表达.Transwell侵袭实验检测以上细胞的侵袭性.结果 肝素酶与CD222均表达于细胞质.加入人重组肝素酶后5637细胞CD222、p-Akt的表达量及侵袭性显著增强为(79.71 ±3.25)个,而上述效应在转染siRNA-CD222后明显降低为(49.61 ±2.88)个,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 5637细胞中肝素酶可与CD222结合,两者共同定位于细胞质.肝素酶通过与其受体CD222细胞外结合可促进Akt磷酸化,进一步促进膀胱癌5637细胞的侵袭。
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