乙型肝炎病毒核心抗原诱饵载体的构建及酵母表达

来源 :热带病与寄生虫学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hh0745cn12

【摘要】

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目的构建乙型肝炎病毒核心抗原真核表达载体，并在酵母细胞中进行表达。方法以实验室保存质粒为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增HBcAg基因，克隆到pGEM—T载体。测序正确后酶切并

【作者】

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王晓春许礼发张超李朝品

【机构】

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安徽理工大学医学院生物医学工程教研室

【出处】

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热带病与寄生虫学

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

：

乙型肝炎病毒 HBCAG 真核表达酵母细胞 Hepatitis B virus HBcAg Eukaryotic expression Yeast ce

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目的构建乙型肝炎病毒核心抗原真核表达载体，并在酵母细胞中进行表达。方法以实验室保存质粒为模板，通过聚合酶链式反应（PCR）扩增HBcAg基因，克隆到pGEM—T载体。测序正确后酶切并连接至酵母表达载体pGBKT7中，转化酵母菌AH109，在色氨酸缺陷型培养基（SD／-Trp／Kanal上筛选阳性菌落后大量表达并提取重组蛋白，再进行SDS—PAGE和Westernblot分析。结果成功构建酵母表达载体pGBKT7-HBcAg，Westernblot结果显示重组蛋白在酵母细胞中正确表达。结论利用真核表达载体在

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