【摘 要】
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目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系.方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prcK,prcR基因的4个同源重组质粒
【机 构】
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黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室 哈尔滨150080黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室 哈尔滨150080;农业微生物技术教育工程研究中心 哈尔滨150080;
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目的:探索同源片段大小与副干酪乳杆菌同源重组率之间的关系.方法:分别构建以氨苄青霉素和四环素抗性标记基因为遗传转化筛选标记的,用于敲除prcK,prcR基因的4个同源重组质粒p2NIL-KA(625 bp,650bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC18-RT(1 350 bp,1 350 bp),并分别电转化于副干酪乳杆菌HD1.7感受态细胞中,检测筛选同源重组转化子,计算发生同源重组的频率.结果:成功构建同源重组质粒,p2NIL-KA (625 bp,650 bp),pUC18-KT(1 350 bp,1 350 bp),p2NIL-RT(433 bp,474 bp),pUC 18-RT(1 350 bp,1 350bp)同源重组频率分别为0,1.85％,0,1.78％.结论:当同源片段长度为1 350 bp或更长时,可与副干酪乳杆菌染色体进行同源重组.
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