人乳头瘤病毒16型L1/E7融合蛋白在原核细胞中的表达及免疫效果观察

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:howard2000_0
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目的 构建能表达L1E7融合蛋白的原核表达菌株,纯化蛋白,并观察其免疫效果.方法用PCR方法分别扩增出C末端部分缺失的HPV16 L1基因和HPV16 E7编码基因N端部分序列.将上述基因连接,构建融合基因L1△CE7N并将其插到原核表达载体pGEX-2T中进行融合蛋白表达纯化,然后观察其免疫效果.结果L1△CE7N融合基因测序结果表明,序列与设计相符,读码框架正确.将其插入原核表达质粒在大肠埃希菌中获得高效表达;经Wester-Blot鉴定在相对分子质量约85×103处有特异性表达带,与预期相符.用亲和层析和分子筛可纯化L1△CE7N融合蛋白,将其免疫C57BL/6小鼠,结果表明融合蛋白能诱发高滴度L1、E7抗体,并能保护小鼠免受TC-1肿瘤细胞的攻击.结论本实验在原核系统中高效表达并纯化了L1△CE7N融合蛋白,该蛋白可作为预防和治疗HPV16感染以及相关肿瘤的候选疫苗株.为研制HPV16预防治疗性疫苗探索一条经济、易普及的途径。

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