重组苦荞麦过敏蛋白TBa的原核表达及其免疫活性鉴定

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zjflxj
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TBa[tartary buckwheat allergen]是苦荞麦中的一种主要过敏蛋白.根据长度为585 bp的TBacDNA序列,以pET-28a为表达载体并选择合适的酶切位点合成上、下游引物,采用基因克隆技术构建重组表达载体pET-28a-TBa.进一步将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.从而获得以包涵体形式存在的TBa目的蛋白.该目的蛋白经Ni2+-NTA琼脂糖柱亲和纯化及SDS-PAGE分析显示,纯度达到95%以上.用透析复性的方法将目的蛋白重折叠,其复性产率可达到约68%.W
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