【摘 要】
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目的 探索lncRNA CASC2 (cancer susceptibility 2)对胶质瘤细胞替莫唑胺(temazolamide,TMZ)敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法 收集2018年7月至2020年3月在我院神经外科手
【机 构】
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443000 湖北宜昌,三峡大学第一临床医学院(宜昌市中心人民医院)神经外科
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目的 探索lncRNA CASC2 (cancer susceptibility 2)对胶质瘤细胞替莫唑胺(temazolamide,TMZ)敏感性的影响,并探讨其作用机制.方法 收集2018年7月至2020年3月在我院神经外科手术治疗的胶质瘤患者病例,比较异柠檬酸脱氢酶1/2(IDH 1/2)突变型胶质瘤组织(17例)与IDH 1/2野生型(9例)组织中lncRNA CASC2表达量,并分析其与胶质瘤病理分级的相关性.培养胶质瘤细胞U251,在转染lncRNA-CASC2过表达质粒、多药耐药蛋白(ABCG2)干扰RNA后,CCK-8及流式细胞仪检测TMZ30 μg/mL作用下,U251细胞活力及凋亡比例变化.构建小鼠颅内胶质瘤模型,高效液相色谱测定肿瘤细胞内TMZ活性产物浓度变化.免疫荧光染色及RNA免疫共沉淀检测lncRNA CASC2与ABCG2相关性.结果 lncRNA CASC2在IDH 1/2野生型胶质瘤组织中表达量降低,与胶质瘤病理分级存在负相关性.U251细胞过表达lncRNA-CASC2后,TMZ的IC50值为(36.7±4.2)μg/mL,低于pc-Null组(t=4.41,P＜0.05).TMZ 30 μg/mL刺激下,过表达lncRNA-CASC2后细胞活力降低,凋亡比例升高.小鼠胶质瘤模型中,过表达lncRNA-CASC2后细胞内TMZ活性产物浓度升高.LncRNA CASC2与ABCG2均分布于细胞质,RNA免疫共沉淀显示:ABCG2抗体组lncRNA CASC2含量高于IgG对照组.此外,通过siRNA下调细胞内ABCG2后,可减弱lncRNA CASC2对U251细胞TMZ敏感性的增强作用.结论 lncRNA CASC2可提高胶质瘤细胞U251对TMZ的敏感性;siRNA抑制细胞内ABCG2后,lncRNA CASC2的上述作用减弱.
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