【摘 要】
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目的:研究LncRNA PROX1-AS1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法:将si-con、si-LncRNA PROX1-AS1、mimic-con、PROX1-AS1 mimic转染至Huh7中,分别记为si-con组、si-LncRNA PROX1-AS1组、mimic-con组、PROX1-AS1 mimic组;正常培养的细胞作为对照(NC)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LncRNA PROX1-AS1表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;蛋白质印
【机 构】
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广州市花都区人民医院 肿瘤科,广东 广州 510800;广州市花都区人民医院 激光美容科,广东 广州 510800;广州市花都区人民医院 妇科,广东 广州 510800
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目的:研究LncRNA PROX1-AS1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法:将si-con、si-LncRNA PROX1-AS1、mimic-con、PROX1-AS1 mimic转染至Huh7中,分别记为si-con组、si-LncRNA PROX1-AS1组、mimic-con组、PROX1-AS1 mimic组;正常培养的细胞作为对照(NC)组.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LncRNA PROX1-AS1表达水平;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;蛋白质印迹(Western blot)法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体含热蛋白结构域3(NLRP3)、前体Caspase-1(pro-Caspase-1)、Caspase-1 p20蛋白表达;Tran-swell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果:与正常肝细胞THLE-3相比,肝癌细胞Hep3B、Huh7、MHCC97L中LncRNA PROX1-AS1高表达(P<0.05).沉默LncRNA PROX1-AS1,细胞活性显著降低,MMP-2、MMP-9表达水平显著降低,细胞迁移和侵袭数显著降低,Cleaved caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1 p20表达水平显著降低,IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.05).结论:沉默LncRNA PROX1-AS1可抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭及诱导细胞凋亡,其机制可能与NLRP3/Caspase-1炎症通路有关.
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