绵羊肌肉抑制素C-端的表达、纯化及多克隆抗体的制备

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lidcc

【摘要】

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为深入了解绵羊myostatin基因的表达及调控机理，进行了绵羊myostatin蛋白多克隆抗体的制备。首先将绵羊myostatin基因C-端克隆入含组氨酸标签的表达载体pET-30a-c（＋）中，转化大肠杆

【作者】

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马毅舒建洪李晴关宏安晓荣陈永福

【机构】

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天津市畜牧兽医研究所,中国农业大学农业生物技术国家重点实验室,浙江理工大学生命科学学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2009年8期

【关键词】

：

绵羊肌肉抑制素克隆原核表达纯化多克隆抗体 sheep myostatin clone procaryote expression purif

【基金项目】

：

天津市自然科学基金（08JCYBJC04500）,天津市农业科学院院长基金（06001）资助

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为深入了解绵羊myostatin基因的表达及调控机理，进行了绵羊myostatin蛋白多克隆抗体的制备。首先将绵羊myostatin基因C-端克隆入含组氨酸标签的表达载体pET-30a-c（＋）中，转化大肠杆菌BL21后IPTG诱导表达，然后利用Ni^2＋亲和层析纯化重组蛋白，薄层扫描及Bradford法分别检测纯化后蛋白的纯度与含量。应用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，利用间接ELISA法检测多克隆抗体效价，用Western blot及免疫细胞化学染色检测抗体特异性。结果，薄层扫描分析纯化后蛋白纯度可达

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