小鼠CD40L基因的克隆与真核细胞表达研究

来源 :实用临床医药杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Bryson

【摘要】

：

目的构建含有小鼠CD40L基因的重组真核表达载体，并鉴定其在转染细胞中的表达。方法自活化的T细胞经RT-PCR得到小鼠CD40L的cDNA基因，将其克隆入真核表达载体pCMV—Myc，获得重组质

【作者】

：

钱莉王骞龚卫娟李国才季明春

【机构】

：

扬州大学医学院,江苏省兴化市人民医院

【出处】

：

实用临床医药杂志

【发表日期】

：

2007年6期

【关键词】

：

鼠CD40L 真核表达载体基因治疗 CD40L gene eukaryotic expression vector gene therapy

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30771955）、江苏省自然科学基金重点项目（BK2006706）、扬州大学科研启动基金

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目的构建含有小鼠CD40L基因的重组真核表达载体，并鉴定其在转染细胞中的表达。方法自活化的T细胞经RT-PCR得到小鼠CD40L的cDNA基因，将其克隆入真核表达载体pCMV—Myc，获得重组质粒pCMV—Myc／CD40L，酶切及测序鉴定；脂质体法转染CHO细胞，使用RT-PCR及流式细胞技术分别从mRNA和蛋白水平对CD40L的表达进行检测。结果将pCMV-Myc／CD40L真核表达载体转染CHO细胞，RT-PCR和流式细胞仪检测证实小鼠CD40L在真核细胞中暂态表达。结论成功地建立表达小鼠CD40L

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