蜘蛛毒素基因(ω-ACTX-Hv2a)的人工合成及定点突变

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蜘蛛毒素(ω-ACTX-Hv2a)是最理想研制成为无公害杀虫剂的昆虫毒素肽之一,但由于其cDNA至今还未被克隆出来;为了进行后续研究工作,笔者选用人工合成的办法进行基因克隆等工作。化学合成4对(Al^-、Al^+,A2^+、A2^+,H3^+、H3^+和H4^-、H4’)单链寡核苷酸片段,然后,将片段Al^-、Al^+、A2^-、A2^+和片段H3^-、H3^+、H4^-、H4^+分别混合后退火连接,形成A和H片段,再将A和H片段在连接酶的作用下,合成全基因Hv2a。经测序可知,合成的Hv2a有5个碱基缺
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