卡介菌-多糖核酸对哮喘小鼠淋巴细胞CD4+CD25+调节性T细胞的影响

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目的 探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘小鼠淋巴细胞CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+T reg细胞)数量及功能的影响.方法 选择Balb/c小鼠,以卵白蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型,分为对照组、哮喘组、BCG-PSN干预组.BCG-PSN剂量为20μg/只,体积为60μl,在致敏前7 d腹腔注射干预,对照组同时给予相同剂量的生理盐水作对照,末次激发后48 h对小鼠进行有创肺功能检测,以乙酰甲胆碱各浓度激发时肺阻力(RL)表示.并收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片后HE染色,计数其中的嗜酸粒细胞(EOS),取各组小鼠脾脏淋巴细胞,体外培养72 h后流式细胞仪检测CD4+CD25+T reg细胞/CD4+T细胞,Real-time PCR检测脾脏淋巴细胞foxp3及CTLA-4基因的表达量,酶联免疫吸附试验法检测脾脏淋巴细胞上清液中白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)的含量.结果 (1)BCG-PSN干预可明显降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症.(2)哮喘组CD4+CD25+T reg细胞/CD4+T细胞比例(3.71±2.20)% 明显低于正常组(6.44±1.16)%(P<0.01),BCG-PSN组(6.75±1.63)% 与哮喘组相比差异有统计学意义(P<0.01).(3)哮喘组小鼠脾脏淋巴细胞foxp3 Mrna、CTLA-4 Mrna的表达量明显低于正常组,BCG-PSN干预可显著提高foxp3 Mrna、CTLA-4 Mrna的表达.(4)哮喘小鼠脾脏淋巴细胞上清中IL-10、TGF-β的含量明显少于正常组.BCG-PSN组IL-10含量为(210.32±88.23)ng/L,显著高于哮喘组(114.41±73.58)ng/L(P<0.05).BCG-PSN组TGF-β含量为(487.66±32.57)ng/L,显著高于哮喘组(97.76±23.58)ng/L(P<0.01).结论 BCG-PSN可增加CD4+ CD25+ Treg细胞数量及功能 ,具体机制可能通过促进IL-10、TGF-β等抑制性细胞因子的分泌 ,及CTLA-4介导的细胞-细胞接触抑制机制诱导免疫耐受 ,从而降低哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症.
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