【摘 要】
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目的 利用数字PCR技术，建立裂谷热病毒核酸的检测方法。方法 依据裂谷热病毒L片段RNA依赖的RNA聚合酶（RdRP）基因序列，设计数字PCR特异性引物和探针，建立使用一步法RT-PCR的裂谷热病毒核酸数字PCR方法，用假病毒质粒评价方法的准确性和灵敏度，同时与荧光PCR的检测结果进行平行比较。用登革病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒、寨卡病毒阳性血清评价方法的特异性，并使用裂谷热毒株和阳性血清进行临床
【基金项目】
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国家科技重大专项（2018ZX10711001）； 广东省科技计划项目（2018B020207013）；
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目的 利用数字PCR技术，建立裂谷热病毒核酸的检测方法。方法 依据裂谷热病毒L片段RNA依赖的RNA聚合酶（RdRP）基因序列，设计数字PCR特异性引物和探针，建立使用一步法RT-PCR的裂谷热病毒核酸数字PCR方法，用假病毒质粒评价方法的准确性和灵敏度，同时与荧光PCR的检测结果进行平行比较。用登革病毒、黄热病毒、基孔肯雅病毒、寨卡病毒阳性血清评价方法的特异性，并使用裂谷热毒株和阳性血清进行临床适用性评价。结果 建立了裂谷热病毒核酸的数字PCR检测方法，检测灵敏度为100拷贝/ml假病毒质粒，与荧光PCR方法灵敏度相当，但稳定性比后者好；可检出裂谷热病毒毒株和裂谷热阳性血清，与其他虫媒病毒无交叉反应。结论 裂谷热病毒数字PCR检测方法具有较高准确性、灵敏度、特异性和临床适用性，能检出临床样本中的裂谷热病毒。
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