【摘 要】
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目的：探讨微小RNA-107 （miR-107）通过丝裂原活化蛋白3激酶7 （MAP3K7）调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇（TAX）耐药性的影响，并阐明其作用机制。方法：293T细胞分为miRNC组（转染miR-NC）和miR-107 mimics组（转染miR-107 mimics）。采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞，获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX。SKOV3/TAX细胞随机分为
【基金项目】
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海南省科技厅科研项目（2019RC391）； 海南省临床医学中心建设项目（QWYH202175）；
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目的：探讨微小RNA-107 （miR-107）通过丝裂原活化蛋白3激酶7 （MAP3K7）调控卵巢癌细胞免疫逃逸对紫杉醇（TAX）耐药性的影响，并阐明其作用机制。方法：293T细胞分为miRNC组（转染miR-NC）和miR-107 mimics组（转染miR-107 mimics）。采用浓度梯度递增法处理卵巢癌SKOV3细胞，获得TAX耐药细胞SKOV3/TAX。SKOV3/TAX细胞随机分为空白对照组、TAX(给予4.0μmol·L-1TAX)组、 TAX+miR-107 mimics (给予4.0μmol·L-1TAX且转染miR-107mimics)组和TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7 (给予4.0μmol·L-1TAX且转染miR-107mimics和pcDNA-MAP3K7)组；分别与人外周血淋巴细胞HPBL共培养，分为HPBL组、HPBL+SKOV3/TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX组、HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组和HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测细胞中miR-107表达水平，双荧光素酶报告基因实验验证miR-107和MAP3K7的靶向关系，Western blotting法检测各组细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平，CCK-8法检测各组细胞存活率，流式细胞术检测各组细胞凋亡率。结果：与人卵巢上皮细胞HOSEpic比较，卵巢癌细胞中miR-107表达水平降低（P＜0.05）。MAP3K7的3’-UTR与miR-107存在靶向结合位点。双荧光素酶报告基因实验，与miR-NC组比较，过表达miR-107组野生型MAP3K7的荧光素酶活性降低（P＜0.01）。Western blotting法检测，过表达miR-107组细胞中MAP3K7蛋白表达水平低于miR-NC组（P＜0.01）。RT-qPCR检测，与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞中miR-107 mRNA表达水平升高（P＜0.01）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞中miR-107mRNA表达水平升高（P＜0.05）。与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低（P＜0.01）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平降低（P＜0.05或P＜0.01）；与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞中MAP3K7和FAS蛋白表达水平升高（P＜0.05或P＜0.01）。与HPBL+SKOV3/TAX组比较，HPBL+SKOV3/TAX+TAX组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低（P＜0.05），细胞凋亡率降低（P＜0.05）；与HPBL+SKOV3/TAX+TAX组比较，HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平和细胞凋亡率降低（P＜0.05）；与HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics组比较，HPBL+SKOV3/TAX+TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组HPBL细胞中FAS蛋白表达水平降低（P＜0.01），且细胞凋亡率降低（P＜0.01）。与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞存活率降低（P＜0.05）；与TAX组比较，TAX+miR-107 mimics组SKOV3/TAX细胞存活率降低（P＜0.05）。与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107mimics+pcDNA-MAP3K7组SKOV3/TAX细胞存活率明显升高（P＜0.05）。与空白对照组比较，TAX组SKOV3/TAX细胞凋亡率明显升高（P＜0.05）；与TAX组比较，TAX+miR-107组SKOV3/TAX细胞凋亡率升高（P＜0.05）；与TAX+miR-107 mimics组比较，TAX+miR-107 mimics+pcDNA-MAP3K7组细胞凋亡率降低（P＜0.05）。结论：miR-107在SKOV3/TAX细胞中呈低表达，且miR-107通过抑制MAP3K7的表达，抑制SKOV3/TAX细胞免疫逃逸，缓解卵巢癌细胞TAX耐药性。
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