目的比较实时荧光定量PCR的三种数据分析方法（2^-△△CT）、REST2009和REST MCS)的异同。方法以正常小鼠来源的cDNA混合物阳性对照为模板,5倍系列稀释.分别做miRNA-181a和Sn RNA U6的标准曲线。实时荧光定量PCR检测正常组和哮喘组小鼠脾脏CD4⁺T细胞miRNA-181a和Sn RNA U6表达水平,以Sn RNA U6为内参基因,采用2^△△CT、REST2009和REST MCS方法,对正常组和哮喘组miRNA-181a进行相对定量分析。结果5倍系列稀释法制作的标准曲线提示miRNA181a和Sn RNA U6基因扩增效率分别为99.8%和99.9%,采用2^△△CT提示,REST2009软件分析,RESTMCS软件分析,皆表明哮喘组miRNA-181a的表达量为正常组的2.92倍,但是三种方法在适用条件、分析数据的多少等方面存在一定的区别。结论三种数据分析方法各有特点,可根据研究者本人的实验要求选择合适的方法。