高羊茅春化基因RNAi表达载体的构建

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[目的]用RNAi干扰技术沉默高羊茅FaVRN1。[方法]将拟南芥内肌动蛋白含子(145bp)插入到表达载体pBI121已构建能形成发夹的中间载体。设计带有限制性内切酶位点的特异性引物,扩增高羊茅春化基因351bp长的外显子靶标序列,限制性酶切后以正向和反向插入到RNA干扰中间载体内含子两端,构建带发夹结构的RNA干扰表达载体。[结果]双酶切结果表明内含子(145bp)已成功连入表达载体。PCR和酶切验证证实目的基因(351bp)已连入中间表达载体。[结论]该研究为培育RNAi转基因开花抑制型高羊茅新品种
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