【摘 要】
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目的软骨细胞培养观察白介素-10(IL-10)对软细胞的直接保护作用.方法取Wistar乳鼠(7-10天)股骨髁关节软骨分离软骨细胞.子一代细胞用含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液在24孔培养
【机 构】
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北京解放军二炮总院骨科北京,北京医科大学医学部三院骨科北京
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目的软骨细胞培养观察白介素-10(IL-10)对软细胞的直接保护作用.方法取Wistar乳鼠(7-10天)股骨髁关节软骨分离软骨细胞.子一代细胞用含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液在24孔培养板中培养.2-4天后换含0.1%FBS DMEM培养液,分别加白介素-1,100?μ/ml,IL-1 100?μ/ml+重组鼠白介素-10,20?ng/ml,rmIL-10 20?ng/ml,继续培养48小时,行扫描电镜观察以及免疫组化和原位杂交,分别观察软骨细胞的生长和形态、一氧化氮合酶2(NOS2)和基质金属蛋白酶3(MMP3)的表达.从软骨细胞培养开始到3周,倒置显微镜下观察细胞生长和形态.结果 IL-1刺激软骨细胞浆内颗粒形成,细胞培养2周后细胞死亡,存活细胞减少.IL-10直接对抗IL-1,细胞结构清晰,细胞培养2周后细胞死亡少见,存活细胞数多,并维持细胞持续生长.扫描电镜观察,IL-1刺激软骨细胞形成密集细胞突起,加IL-10的软骨细胞突起无变化.免疫组化和原位杂交显示IL-10抑制NOS2和MMP3的表达.结论 IL-10不仅抑制致炎细胞因子合成,而且直接对抗IL-1,对软骨细胞有直接保护作用.IL-10可望成为治疗0A的新的有效途径.
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