利用RT—PCR和Dig—cDNA探针检测百合无症病毒

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根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT—PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性。用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点、杂交检测体系。本研究分别建立了用于LSV的特异性的高灵敏度RT—PCR检测体系(其检测灵敏度为1.4ng/叶片)和适合大通量检测的Dig—cDNA(地高辛标记)核酸斑点杂交检测体系(其检测灵敏度为20μg/叶片)。
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