聚合酶链反应指纹图HLA-DPB1分型法的建立与验证

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为适应从大批无关人群中筛选骨髓供者,依据聚合酶链反应(PCR)杂合双链原理建立了HLA-DPB1 PCR指纹图(PCRF)分型法.该方法不像单链构象多态性聚合酶链反应(PCR-SSCP)那样要求严格的实验条件,只需将PCR产物94℃变性2分钟,37℃复性8分钟,再用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离5小时,经溴乙锭或银染后照相即可完成.用21例由限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)法确定了HLA-DPB1基因型的家系样品的验证表明,21例9种HLA-DPB1基因型中有8种PCRF格局与之对应,除一对外,HLA-DPB1基因型相同者的PCRF格局也相同.认为该方法具有较高的分辨率和特异性,以8%的聚丙烯酰胺凝胶电泳为最佳.

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