目的 制备载尿激酶(uPA)阴离子脂质微泡,探讨其联合低频超声的体外溶栓效果.方法 利用二硬脂酸磷酯酰胆碱(DSPC)、二棕榈酰磷酯酰甘油(DPPG)、PEG2000修饰二硬脂酸磷酯酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)3种磷脂,通过机械振荡法制备阴离子微泡,再将微泡与uPA混合孵育,两者结合即得载药微泡,用粒径分析仪测定其粒径及分布.用FITC标记uPA,制得荧光标记的载药微泡,在荧光显微镜下观察微泡的形态及uPA与微泡的黏附情况.用Zeta电位仪分别测定载药微泡与未载药微泡的表面电荷;用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对载药微泡进行验证;测量加入10 000、50 000和100 000 U uPA时微泡的包封率.抽取大鼠血液制作体外血栓模型,测定载药微泡联合低频超声的体外溶栓效果.采用两样本t检验、单因素方差分析及Bonferroni法进行数据比较.结果 载药微泡的平均粒径为(1.76±0.29)μm,在荧光显微镜下可以观察到FITC标记的uPA成功结合到阴离子微泡表面.载药微泡的表面电荷明显低于未载药微泡的表面电荷:(-36.64±0.21)mV与(-66.33±2.38)mV,t=21.538,P＜0.05;SDS-PAGE显示载药微泡的泳道有明显的蛋白质条带,而未载药微泡没有;当uPA加入量分别为10000、50 000和100 000 U时,药物包封率分别为(42.01±2.02)％、(33.24±1.95)％和(33.10± 1.65)％ (F=22.340,P＜0.05).生理盐水组、生理盐水+超声组、未载药微泡+超声组、载药微泡+超声组、单纯uPA组的体外溶栓效率分别为(4.09±0.80)％、(8.50±1.48)％、(14.27±1.59)％、(35.72±6.31)％、(16.87±0.46)％,载药微泡+超声组最高(F=48.783,t=-8.613、-7.273、-5.942及-6.908,均P＜0.05).结论 阴离子微泡能成功搭载uPA,该微泡联合低频超声的溶栓效果良好。
载尿激酶阴离子脂质微泡联合低频超声体外溶栓的效率研究
【摘 要】
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目的 制备载尿激酶(uPA)阴离子脂质微泡,探讨其联合低频超声的体外溶栓效果.方法 利用二硬脂酸磷酯酰胆碱(DSPC)、二棕榈酰磷酯酰甘油(DPPG)、PEG2000修饰二硬脂酸磷酯酰乙醇胺(DSPE-PEG2000)3种磷脂,通过机械振荡法制备阴离子微泡,再将微泡与uPA混合孵育,两者结合即得载药微泡,用粒径分析仪测定其粒径及分布.用FITC标记uPA,制得荧光标记的载药微泡,在荧光显微镜下观察
【机 构】
：
510630广州,南方医科大学第三附属医院超声医学科,中山大学附属第三医院超声医学科,中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所,中国科学院深圳先进技术研究院生物医学与健康工程研究所,510
【出 处】
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中华核医学与分子影像杂志
【发表日期】
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2014年34期
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