【摘 要】
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目的 研究腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α在宫颈癌中的表达及其作用机制.方法 蛋白质印迹方法检测宫颈癌细胞株HeLa、SiHa细胞中AMPKα1和AMPKα2的表达情况,采用免疫组织化学染
【机 构】
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100029,北京市心肺血管疾病研究所首都医科大学附属北京安贞医院妇产科
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目的 研究腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)α在宫颈癌中的表达及其作用机制.方法 蛋白质印迹方法检测宫颈癌细胞株HeLa、SiHa细胞中AMPKα1和AMPKα2的表达情况,采用免疫组织化学染色方法检测宫颈癌和正常组织中磷酸化AMPKα (p-AMPKα)的表达情况;采用短干扰RNA(siRNA)降低宫颈癌细胞中AMPKα1和AMPKα2表达水平后,采用蛋白质印迹方法检测相关信号通路、5-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖能力.结果 HeLa、SiHa细胞中AMPKα1及AMPKα2均有表达;与正常宫颈组织相比,宫颈癌组织中p-AMPKα表达明显升高[(78.140±2.525)％比(0.209±0.014)％],差异有统计学意义(P＜0.05).将AMPKα1 siRNA和AMPKα2 siRNA联合转染细胞24 h后,与阴性对照siRNA相比,AMPKα表达水平明显降低,磷酸化雷帕霉素蛋白1(p-mTOR 1)、磷酸化真核生物转录起始因子4E结合蛋白(p-4E-BP1)水平明显升高,细胞增殖能力均明显增强[HeLa细胞:(3.23±0.24)％比(1.50±0.08)％,SiHa细胞:(2.48±0.16)％比(1.11±0.19)％],差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 宫颈癌细胞中AMPKα活性增强,降低AMPKα水平可促进mTOR1的激活,进而增强肿瘤细胞的增殖.
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